GB/T 21319-2007动物源食品中阿维菌素类药物残留的测定　酶联免疫吸附法.pdf

ICS 67. 120 X 04 OB 中华人民共和国国家标准 GB/T 21319—2007 动物源食品中阿维菌素类药物 残留的测定酶联免疫吸附法 Determination of avermectins residues in foodstuffs of animal origin — Enzyme linked immunosorbent assay 2007-10-29 发布 2008-04-01 实施 发布 GB/T 21319—2007 -xr. —a— 刖 目 本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。 本标准起草单位 ：中国农业大学、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：沈建忠、史为民、万宇平、何方洋、吴聪明、张素霞、冯才伟、彭涛、国伟。 GB/T 21319—2007 动物源食品中阿维菌素类药物 残留的测定酶联免疫吸附法 1范围 本标准规定了动物源食品中阿维菌素类药物残留量的酶联免疫吸附测定法。 本标准适用于牛肉和牛肝中阿维菌素、伊维菌素和埃普利诺菌素残留量的测定。 本标准的方法检测限：阿维菌素类药物在牛肝组织和牛肉组织中的检测限均为2 “g/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注日期的引用文件 ，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682— 1992,neq ISO 3696：1987） 3原理 采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上包被偶联抗原，试样中残留的阿维菌素类药物与酶标板上 的偶联抗原竞争阿维菌素抗体，加入酶标记的抗体后 ，显色剂显色，终止液终止反应 。用酶标仪在 450 nm处测定吸光度，吸光值与阿维菌素类药物残留量成负相关，与标准曲线比较即可得出阿维菌素 类药物残留含量。 4试剂和材料 4. 1阿维菌素类药物试剂盒 4.1.1 96孔板 （12条X8孑L 包被有阿维菌素偶联抗原。 4. 1.2阿维菌素标准溶液（至少有5个倍比稀释浓度水平，外加1个空白）。 4.1.3阿维菌素抗体溶液。 4.1.4过氧化物酶标记物。 4.1.5底物显色溶液A液：过氧化尿素。 4.1.6底物显色溶液B液：四甲基联苯胺。 4. 1.7反应终止液：1 mol/L硫酸。 4.1.8缓冲液（2倍浓缩液）。 4.1.9洗涤液（20倍浓缩液）。 4.2乙睛、正己烷、无水硫酸钠 （分析纯）。 4. 3 碱性氧化铝柱 Sep-Pak Vac 12 cc（2 g 。 4.4 水:GB/T 6682规定的一级水。 4.5缓冲液工作液:用水将2倍的浓缩缓冲液按1 : 1体积比进行稀释 （1份2倍浓缩缓冲液+ 1份 水），用于溶解干燥的残留物，缓冲液工作液在4°C可保存一个月。 4.6洗涤液工作液：用水将20倍的浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释 （1份20倍浓缩洗涤液+ 19 份水），用于酶标板的洗涤，洗涤工作液在4C可保存一个月。