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- 2019-06-17 发布于江西
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实验一 母种培养基配制(4学时)
一、实验目的
掌握固化培养基的配制,学会棉塞的制作方法。分析有天然原料与无天然原料培养基在配制过程中的不同。
二、基本技能训练内容
制备马铃薯滤液;融化琼脂;培养基的分装;棉塞的制作。
三、主要仪器设备与材料
天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等;马铃薯、葡萄糖或蔗糖、麸皮、琼脂、水。
四、实验方法
1、配方(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,自来水1000ml,pH自然。
2、制作方法
1)制滤液:马铃薯去皮和芽眼,切成0.5mm粗的长条,称取200g放入锅中,加水1000ml,将其煮沸后再文火煮20min。用双层纱布过滤,滤液用水定容至1000ml。
2)化琼脂:将滤液加热至即将沸腾时加入琼脂,不断搅拌(控制火力不要使培养基溢出或烧焦)。琼脂完全融化后加入剩余原料,并使其溶解(用热水不足水量)。
3)分装:通过漏斗装置,趁热将培养基分装于试管中,装量约占试管高度的1/4(分装三角瓶以不超过其容积的一半为宜)。管口或瓶口不要沾染培养基。
4)制棉塞:棉花以白色长绒的不脱脂棉花为宜。根据试管口大小取棉花,将其卷成棉塞,最好外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞长度约6~7cm,塞入
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