黄连水提液抑制蓝藻并增强鲢鱼抗微囊藻毒素的能力-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

汕头大学硕士学位论文 汕头大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 摘 要 微囊藻水华暴发抑制其他藻类和水生植物的光合作用，释放藻毒素及硫化氢 等有毒物质，直接危害水生动物。水生生物死亡后被微生物分解，又会消耗大量 的溶解氧，造成鱼类病害。到次年气温升高，微囊藻会再次爆发，使水体环境进 入恶 性循 环。本 论文 研究 了鬼针 草、 黄连 、夹竹 桃等 中草药 对铜 绿微 囊藻 (Microcystis aeruginosa)的抑制作用，所筛选的 9 种中草药抑制作用由大到小依次 是黄连、夹竹桃、车前草、蛇竹草、火炭母，蛇舌草、白饭草、艾叶和鬼针草不 具有抑制铜绿微囊藻的作用。深入研究黄连水提液对铜绿微囊藻的抑制作用，黄 连处理组的藻液蛋白含量呈上升趋势，叶绿素 a 和糖类呈下降趋势；空白组的蛋 白质、糖类和叶绿素 a 都上升。黄连处理组的藻细胞外蛋白含量在 72h 内剧烈上 升，72h 后快速下降，藻细胞外糖类缓慢下降；空白组的藻细胞外蛋白基本维持 稳定，糖类含量缓慢下降。用高效液相色谱法检测微囊藻毒素 MC-LR，发现黄 连水提取液处理组的铜绿微囊藻细胞内 MC-LR 含量 120h 后降低了 82.4%；空白 组的铜绿微囊藻细胞内和细胞外 MC-LR 含量都随抑制时间延长而升高。黄连可 能首先影响了铜绿微囊藻的光合作用，进而抑制了蛋白质和糖类合成，最终导致 其死亡。 黄 连 水 提 液 作 为 饲 料 添 加 剂 以 5mg 黄 连 /g 基 础 饲 料 剂 量 喂 养 白 鲢 鱼 ( Hypophthalmichthys molitrix)，14d 后药物组体重增重率低于对照组；喂药组脂 肪酶活力高于对照组，胃蛋白酶和淀粉酶活力低于对照组，差异不显著(P0.05 )。 14d 后将鱼放入藻液中，2h 后取鲢鱼肠道检测，发现对照组和喂药组的脂肪酶活 力升高，组内比较差异达到了极显著水平(P0.01)；胃蛋白酶活力升高，不存在 显著性差异(P0.05 )。喂药组淀粉酶活力极显著降低(P0.01)，对照组淀粉酶活 力显著降低(P0.05)。组间比较，喂药组胃蛋白酶活力低于对照组，脂肪酶和淀 粉酶活力高于对照组，不存在显著性差异(P0.05 )。表明黄连作为鱼类饲料添加 剂可以提高肠道脂肪酶活力，降低胃蛋白酶活力，能保持鲢鱼在微藻水体生存期 间的淀粉酶活力。 还原型谷胱甘肽 GSH 是鲢鱼肝脏中的主要的解毒物质，其与微囊藻毒素结 合的过程由可溶性谷胱甘肽 S-转移酶(Soluble glutathione S-transferase, sGST)催 I 化。本实验发现在正常饲养条件下，药物组鲢鱼肝脏 GSH 和 sGST 含量均高于 药物组，差异不显著(P0.05 )。将鲢鱼放入铜绿微囊藻水体中，24h 后取鲢鱼肝 脏检测发现对照组 GSH、sGST 活力降低(P0.05 )，喂药组 GSH、sGST 活力升 高(P0.01)，且高于对照组(P0.01)。表明黄连作为鱼类饲料添加剂增强了鲢鱼对 微囊藻毒素的解毒能力，提高了在藻液中的生存能力。 关键词：黄连；铜绿微囊藻；MC-LR；消化酶；GSH；sGST II Abstract Cyanobacteria(blue-green algae) blooms inhibit photosynthesis of other algaes and aquatic plants, release microcystin and H2S, which are threats to aquatic animal and human. Once aquatic animals killed, their corpses would be disintegrated by microbes, a process that dissoved oxygen consumed and then causing fish diseases. When the temperatuer rises next year, algae blooms again. That makes a vicious circle in the water environment. Chinese medicinal herbs such as Bidens pilosa, coptis chinensis and Nerium oleander were used to inhibit Microcystis aeruginosa in the lab. The result shew that the inhibitory effects of coptis chinensis ranked top of these 9 h