微生物学实验(详细介绍).pptVIP

实验十 平板菌落计数法 实验十一 微生物生长曲线的测定 实验十二 理化及生物因素对微生物生长 的影响 实验十三 微生物的生理生化反应特性 实验十四 微生物菌种保藏技术 实验一 显微镜使用及微生物形态观察 一、目的要求 1.学习显微镜的结构、功能和使用方法。 2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。 二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 普通生物显微镜由3部分构成： ①照明系统：包括光源和聚光器。 ②光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。 ③机械装置：用于固定材料和观察方便，包括镜台(载物台) 、调节器和、物镜转换器(旋转器)。 与其他物镜不同，油镜需在载玻片与镜头之间加滴镜油，原因有二： 1.增加照明亮度 油镜的放大倍数可达100x，教具很短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。为了不使通过的光线有所损失，必须造又精于加入与玻璃的折射率（n=1.55）相仿的镜油。通常用香柏油（n=1.52）. 2.增加显微镜的分辨率 油镜的分辨率可达到0.2μm左右。 5.相差显微镜 6. 偏光显微镜 偏光显微镜（polarizing microscope）用于检测具有双折射性的物质，如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。 显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积， 公式为: M = K1xK2 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时，不仅是这一物点，而且它的 上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全厚度，必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。 厚标本和薄标本 三、 实验步骤 (一) 显微镜的使用 1. 观察前的准备工作 (1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯，观察时要双眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。 (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。 (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。 瞳 距 调 节 屈 光 度 调 节 粗 调 松 紧 调 节 旋 钮 聚 光 镜 中 心 调 节 孔径光栏调节 孔径光栏开度与图象 孔径光栏的运用 四、显微镜保养和使用中的注意事项 1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度 3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。 5.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。 五、记录实验结果 绘图 六、 思考题 1.使用油镜时，为使么选用香柏油或液体石蜡作为物镜与玻片间的介质？其他液体行吗？ 2.油镜用毕后，为什么必须把镜油擦净？用过多的二甲苯或用酒精擦镜有什么危害？ 3.什么是物镜的同焦现象？他在显微镜观察中有什么意义？ 4.观察时为什么要用左眼，并且两眼都应睁开？ 一、实验目的 1. 掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法； 2. 了解玻璃器皿的灭菌方法和原理。 二、实验原理 微生物学实验所用的器皿，大多要进行消毒、灭菌和用来培养微生物，因此对其质量、洗涤和包装方法均有一定的要求。清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，包扎方法要能保证防止污染杂菌。空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌，则要多用几层报纸包扎。 三、实验器材 试管、培养皿、吸管、棉花、包扎绳、三角瓶、电热烘箱等。 四、操作步骤 （一）、玻璃器皿的洗涤方法 1、新玻璃器皿的洗涤 在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。 2、旧玻璃器皿的洗涤 （1）试管、培养皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗 装有固体培养基：刮掉，洗涤 带菌的器皿：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸0.5小时，然后洗涤 带病原菌培养物的器皿：先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后在洗涤 （2）玻璃吸管：吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。 塞有棉花的吸管：用水将棉花冲出，然后冲洗 吸过含有微生物培养物的吸管：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时然后洗涤 吸管内壁有油垢：洗涤液中浸泡数小时，再冲洗 （3）载玻片与盖玻片 带有香柏油：用皱纹纸擦或在二甲苯中摇晃几次，然后在肥皂水中煮沸5-10分钟，用软布或脱脂棉擦拭，立即用自来水冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0.5-2小时，自来水冲洗，干后在95%乙醇中保存备用。 检查过活菌的：2%来苏尔或0.25