GB/T 35515-2017化学品　鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法.pdf

ICS 13.300； 13.020.40 A 80 £3© 中华人民共和国国家标准 GB/T 35515—2017 化学品鱼类雌激素、雄激素和芳香酶 抑制活性试验方 Chemicals —Fish assay for oestrogenic and androgenic activity, and aromatase inhibition 2017-12-29 发布 2018-07-01 实施 发布 GB/T 35515—2017 目 次 前言 in 引言w 1范围1 2 术语、定义和缩略语1 3方法概述 1 4 质量保证与质量控制 2 5仪器设备 2 6 试验准备 2 6.1 试验用水2 6.2 鱼的驯养2 6.3 预暴露和鱼的选择3 7 试验程序 3 7.1 一般说明3 7.2试验浓度的选择 3 8 试验过程 3 8.1 受试鱼的选择与称重3 8.2 暴露条件3 62.1 时间 3 62.2 驯养 3 62.3 灯光和温度 4 8.3 测试频率4 8.4 观察4 64.1 死亡率4 64.2 行为和表观4 64.3 鱼的安乐死4 64.4 第二性征的观察4 64.5 卵黄蛋白原测定 5 9数据和报告5 9.1采用方差分析（ANOVA）对生物标志物响应进行评价5 9.2 试验结果报告 5 附录A （资料性附录 ）进行卵黄蛋白原分析的样品收集推荐程序 7 附录B （资料性附录 ）检测特定内分泌活性物质对黑头呆鱼和青鳄的第二性征的评估 16 附录C （资料性附录 ）鱼类内分泌筛选试验的实验条件 21 附录D （资料性附录 ）斑马鱼和黑头呆鱼的产卵基板 23 附录E （资料性附录 ）可接受的稀释水的一些化学特性 25 T GB/T 35515—2017 附录F （资料性附录 ）卵黄蛋白原加标和批间标准品分析26 附录G （资料性附录 ）统计分析流程27 附录 （规范性附录 ）试验结果阐释和可接受性的标准 28 参考文献 29 图A.1用剪刀沿着胸鳍前剪开 8 图A.2用剪刀沿着腹部中线伸入腹部离肛门头部大约2 mm处9 图A.3采用手术钳撑开腹壁，暴露肝脏以及其他内部器官 （或者将腹壁横向固定 ）9 图A.4采用手术钳缓慢分离和切除肝脏10 图A.5采用手术钳缓慢摘取肠道 10 图A.6肠道以及任何肠系膜的附属物的终端采用剪刀切割11 图A.7 （雌鱼）对于雌鱼过程相同 11 图A.8完成整个过程 12 图A.9 斑马鱼鱼头鱼尾的切分 15 图B.1黑头呆鱼珠星的数目和尺寸 17 图B.2臀鳍形状和尺寸的性别差异19 图B.3臀鳍线的结合板上的突起过程 20 图B.4 带有切割点的鱼身照片20 图D.1 斑马鱼产卵基板 23 图D.2黑头呆鱼产卵基板24 图G.1统计分析流程图 27 表B.1黑头呆鱼珠星模板18 表C.1 鱼类内分泌筛选试验的实验条件21 表E.1可接受的稀释水的一些化学特性 25 n