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专题一 基因工程总复习 考纲考点 近五年江苏高考关于本章的考察情况: 命题趋势 由上述分析可以看出这部分知识则在每年的生物高考题都有出现,且主要集中在对基因工程的原理,技术和应用的考察。预计2014生物高考仍将考察这些内容,且主要以非选择题的形式呈现。因此在复习备考中应注意加强这部分知识的学习。 第一讲 基因工程 学习目标 1.简述基因工程的原理 2.说出DNA重组技术的基本工具及其作用,特点。 3.简述基因工程基本操作程序,以及各步骤的一般方法,原理 4.模拟重组DNA分子的操作过程 5.举例说出基因工程在农业,医疗和环境保护等方面的广泛应用及其发展前景 6.简述蛋白质工程的原理 考点1工具酶与载体 一.基因工程的概念 举例:抗虫棉的培育过程 1.限制酶 (3)切割后形成什么? 3.基因进入受体细胞的载体 (1)作用:将目的基因导入受体细胞(如抗虫棉) (2)常用的运载体:质粒,动植物病毒,噬菌体: 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位。一般指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核以外的双链环状DNA分子。 ①能自我复制; ②含有遗传性标记基因,便于鉴定和筛选重组DNA分子; ③具有单一的多个限制酶的酶切位点,便于外源DNA分子的插入; ④低分子量,易于操作和分离纯化。 【典例训练2】( (多选)(2012如皋中学)若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。下列表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述中,正确的是( ) A该正常基因中有3个CCTAGG序列 B产生的DNA片段可用核糖核苷酸连接酶连接起来 C用该酶处理得到图示基因片断要水解3个磷酸二酯键 D若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG,用该酶处理后将产生5个片断 * * A 生物武器对人类的威胁 A 转基因生物的安全性 A 蛋白质工程 B 基因工程的应用 A 基因工程的原理和技术 A 基因工程的诞生 等级要求 考试说明 15考察转基因生物的安全性知识22考察基因工程的相关内容应用 13 32考察基因工程的原理技术和应用 12 33考察PCR技术和工具酶的应用 11 18考察转基因的安全性知识27考察基因工程的原理技术和应用 10 34考察基因工程的原理,技术和应用 09 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术,通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 苏云金杆菌 毒蛋白基因 毒蛋白 棉花细胞 杀死害虫 目的基因 体外 分子 基因重组 受体 远缘杂交不亲和 性状 准确切割DNA工具--“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具--“分子缝合针”——DNA连接酶 基因转移工具---“分子运输车”——运载体 二.DNA重组技术的基本工具 (2)特点:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。 例如:(E.coli)的一种限制酶能识别 GAATTC序列,并在G和A之间 切开。 (1)来源:主要从_____生物中分离纯化出来。 原核 G A A T T C C T T A A G ↓ 限制酶 ↓ G A A T T C C T T A A G ↓ 限制酶 ↓ 切割磷酸二酯键 A A T T C C T T A A G G 氢键自动断裂 限制酶 识别序列 限制性核酸内切酶(称限制酶)能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一 条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 粘性末端或平口末端 思考:把两种来源不同的DNA用同一种酶切割,会怎样呢? DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。 磷酸二酯键 2、 DNA连接酶 (1)种类: (2)作用部位: E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 【疑难剖析】 五种DNA相关酶的比较: 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA解旋酶 DNA (水解)酶 作用底物 作用部位 形成产物 DNA分子 磷酸二酯键 黏性末端或平末端 DNA片段 磷酸二酯键 重组DNA分子 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 子代DNA DNA分子 DNA分子 碱基对间的氢键 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸单链 游离的脱氧核苷酸 (3)特点: 【高考警示钟】 1.切割质粒需使用限制酶1次,切割目的基因则需要使用相同的限制酶2次。因为质粒是环状DNA,而目的基因在DNA分子链上。 2.
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