实验二果蝇唾腺染色体标本的制备与观察.docVIP

PAGE 目 录 TOC \o 1-1 \h \z \u 前 言 1 实验一 果蝇的性状观察和性别鉴定 2 实验二 果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 3 实验三 果蝇的单因子实验 5 实验四 果蝇的伴性遗传 7 实验五 果蝇的三点测交实验 9 实验六 减数分裂的制片与观察 11 实验七 去壁低渗法制备植物染色体标本 15 实验八 染色体核型分析 18 实验九 植物多倍体的人工诱导和鉴定 20 实验十 小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察 22 实验十一 染色体的分带实验 24 实验十二 诱变物质的微核检测试验 26 实验十三 粗糙链孢霉的杂交 27 实验十四 太原市污水对大麦根尖遗传损伤的研究 30 PAGE 6 前 言 遗传学实验是生物科学专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由验证性、综合性、设计性等多层次实验内容构成，目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。本课程的任务是从个体、细胞、分子三个水平揭示遗传学的基本现象与规律，培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术，并初步掌握现代遗传学实验操作技能，熟悉遗传学分析方法，同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。 实验一 果蝇的性状观察和性别鉴定 一、实验目的 了解果蝇的生活史，识别雌雄果蝇，观察常见的几种突变型。二、实验原理 果蝇为完全变态发育的双翅目昆虫，具有生活史短、突变型多、染色体数目少（2n=8）、繁殖率高、饲养简便等特点，是遗传学研究的好材料。果蝇的性染色体属于XY型（雌蝇为XX，雄蝇为XY）。 雌雄果蝇的主要形态特征 性状 雌蝇 雄蝇 体型 较大 较小 腹部末端 宽厚，成卵圆形，末端稍尖 窄小，呈柱状，末端钝圆 腹背黑色环纹 5条宽窄相近 3条，上部两条窄，最后一条宽，呈一明显黑斑 腹片数 6 4 性梳 无 有（位于前足附节上）形似小梳 外生殖器 阴道板、肛上板，色浅 生殖弧、肛上板及阳具等，色深 野生型和几种突变型的鉴别 性状 野生型 白眼 残翅 三隐 眼色 红 白 红 白 翅型 长 长 残 小 刚毛 直 直 直 焦 三、实验用品 1、材料：果蝇（野生型 白眼 残翅 三隐）。 2、用具：毛笔、麻醉瓶、白纸、乙醚。 四、实验步骤 1、将果蝇培养瓶与麻醉瓶瓶口对接，培养瓶在下，麻醉瓶在上，双手遮住培养瓶，利用果蝇的趋光性将果蝇引入麻醉瓶；或培养瓶在上，轻拍瓶壁将果蝇震入麻醉瓶。然后在麻醉瓶的小口棉塞滴加1—2滴乙醚，待麻醉后倒在白纸上观察。如乙醚滴加过量，果蝇翅膀外展死亡。 2、观察：将果蝇置于解剖镜下观察，观察过程中若果蝇醒来，用麻醉瓶或培养皿扣住果蝇，塞入滴有乙醚的棉花使其麻醉。 ?五、作业 1、简述果蝇的生活史和饲养方法。 2、果蝇作为一种遗传学模式动物具有哪些优点。 实验二 果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 一、实验目的 1、练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法。 2、观察果蝇唾腺巨大染色体的结构特点。 3、了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义。 二、实验原理 本世纪初，D. Kostoff用压片法首先在D. melanogaster 果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosome）。事实上，双翅目昆虫（如摇蚊、果蝇等）的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。 双翅目昆虫的整个消化道细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂，而停止在分裂间期。但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，细胞核中的染色体，尤其是唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5?m宽，400?m 唾液腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋白纤维丝合在一起，紧密盘绕。所以配对的染色体只呈现单倍数。黑腹果蝇的染色体数为2n=2×4，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体（图1）。而唾液腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的