家兔免疫血清球蛋白分离与纯度鉴定.ppt

家兔免疫血清 ??球蛋白分离与纯度鉴定 一、目的要求 1. 了解层析原理 2. 掌握醋酸纤维薄膜电泳技术 二、实验原理 层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)的差异，在两相运动中，不断地进行交换、分配、吸附及解吸附等过程，可将各组分间的微小差异经过相同的重复过程而达到分离。配合相应的光学、电学和电化学检测手段，可用于定性、定量和纯化某种物质，其纯度高达99%。层析法的特点是分离率、灵敏度(pg-fg级)、选择性均高的一种分离方法。尤其适合样品含量少，而杂质含量多的复杂生物样品的分析。 无论哪种层析均由固定相和流动相组成。固定相可以是固体也可以是液体，但这个液体必须附载在某个固体物质上，该物质称载体或担体(Support)。同样流动相可以是液体也可以是气体。 层析技术的分类 一、按层析原理分类 吸附层析(Absorption Chromatography) 固定相是固体吸附剂，利用各组分在吸附剂表面吸附能力的差别而进行分离。 分配层析(Partition Chromatography) 固定相为液体，利用各组分在两液相中分配系数的差别或溶解度不同使物质分离