作业2：氨基酸与蛋白质一级结构.docVIP

生物技术1001班 李久香 作业2：氨基酸与蛋白质一级结构 1.解释下列名词： ① 两性离子（dipolarion）:带相反电荷的极性分子 ② 必需氨基酸（essential amino acid）：只能在体内合成不能从外界摄取的氨基酸 ③ 非蛋白质氨基酸(nonprotein amino acid)：不存在于蛋白质分子中而以游离状态和结合状态存在于生物体的各种组织和细胞的氨基酸 ④ 等电点(isoelectric point,pI) :物质以两性离子形式存在，处于完全解离状态，无静电荷变化，呈电中性，在电场中不移动时的pH ⑤ 肽平面（peptide plane）或肽基（peptide group）：与肽键相连的亚氨基、羰基和两端的a-C构成的一个近似的平面 ⑥ 蛋白质一级结构(protein primary structure)：氨基酸的排列顺序 ⑦ 盐析(salting out)：随着溶液中盐浓度的逐渐升高，蛋白质的溶解度逐渐降低，蛋白质分子彼此聚集而沉淀下来的现象 ⑧ 盐溶(salting in) ：在盐浓度很稀的范围内，随着盐浓度的升高，球状蛋白质的溶解度也升高的现象 ⑨ Edman降解（Edman degradation）: 用苯异硫氰酸在温和的碱性条件下，与肽链N-末端残基自由的α-氨基反应，生成苯氨基硫甲酰基衍生物，即PTC-多肽。除去过量的试剂，用无水三氟乙酸处理，即可释放氨基末端残基的噻唑啉酮衍生物。噻唑啉酮-氨基酸可用有机溶剂抽提，再用含水酸处理，转变成更稳定的乙内酰苯硫脲-氨基酸，鉴定该氨基酸衍生物，即可知N-末端残基是何种氨基酸。由于用弱酸处理，条件温和，未打断肽链中的其他肽键。因此，上述反映的第二个常务被分离之后，可重复上述反映。这个循环方法即称Edman降解法 ⑩ 蛋白质的沉淀作用(precipitation)：由于外界条件改变,蛋白质水化膜被除去且其电荷被中和时,蛋白质凝聚成团下沉,但其结构未变. 2.填空 ① 蛋白质中的_酪氨酸_、_色氨酸_和__苯丙氨酸_3种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。 ② 当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_两性_离子形式存在，当pHpI时，氨基酸以羧基负离子形式存在。将精氨酸（pI值为10.76）溶于pH7的缓冲液，并置于电场中，则精氨酸向电场的__负__方向移动。 ③谷氨酸的pK1(α-COOH)＝2.19, pK2 (α-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为_3.22_。 ④ 氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成_蓝紫 色化合物，而_脯氨酸_与茚三酮反应生成黄色化合物。 ⑤ 蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的 氨 基和另一氨基酸的_羧_基连接而形成的。 ⑥ 大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_16__%，如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为_6.25___%。 ⑦ 用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的pH条件下，不同蛋白质的__等电点______、_分子大小__和__电荷___不同，因而在电场中移动的__方向__和_速度_不同，从而使蛋白质得到分离。 ⑧ 鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有__2,4—二硝基氟苯__和_二甲基氨基萘磺酰氯。 ⑨ 今有甲、乙、丙三种蛋白质，它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_不移动_，乙_正向移动__，丙_负向移动_。 ⑩ 将分子量分别为a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_cab__。 3.氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸： （a）含有一个羟基。Tyr Ser Thr （b）含有一个氨基。Arg Asn Gln （c）含有一个具有芳香族性质的基团。Phe Trp Tyr （d）含有分支的脂肪族烃链。Val Leu Ile （e）含有硫原子。Cys （f）含有一个在pH 7－10范围内可作为亲核体的基团或原子，指出该亲核基团或原子。 Ser, Thr和Tyr中的-OH；Cys和Met中的S，Asp和Glu中的-COO-；His和Lys中的N 4.向1L1mol/L的处于等电点的甘氨酸溶液加入0.3molHCl,问所得溶液的pH是多少？如果加入0.3molNaOH以代替HCl时，pH将是多少？pH1=2.71 pH2=9.23 5．计算0.25mol/L的组氨酸溶液在pH6.4时各种离子形式的浓度（mol/L）。 His2+为1.78×10-