《遗传学》07.细菌和病毒的遗传(55P).ppt

第七章 细菌和病毒的遗传 ;本章重点： 细菌四种拟有性生殖的区别 F＋、F，和Hfr的异同点 部分二倍体交换重组作图 本章难点： 噬菌体遗传分析 利用并发转导基因定位 重组作图 ;第一节 细菌和病毒的遗传研究 方法及意义 一、细菌的研究方法 1．单胞分离 菌液 稀释 涂布在固体 培基 单个细胞分离 形成肉眼可见菌落 ;细菌单胞分离;2．影印法测定变异 采用影印法测定细菌是否发生变异以及发生何 种变异。 细菌变异主要有形态特征变异和生理特性变异。 形态特征变异：菌落大小、形状、颜色 生理特性变异： （1）营养缺陷型：丧失合成某种营养物质的能力，在基本培养基上不能生长。 原养型（野生型）：能够在基本培养基上生长。 （2）抗性突变：抗药性和抗感染型。;影印法测定细菌变异;影印法过程示意图;二、病毒的研究方法 1. 获得变异 亚硝酸、羟胺、乙基黄酸乙酯（EES）等 化学药剂诱导发生变异。 常见变异： 寄主范围变异：野生型（h＋）、突变型（h） 噬菌斑突变：野生型（r＋）、突变型（r） 2．杂交试验 双重感染分析子代噬菌体中重组型的频率。;三、细菌和病毒遗传研究的优越性 1．世代周期短。细菌每20分钟可繁殖一代，病毒每 小时上百几何级数繁殖增加。 2．便于管理和生化分析。个体小，操作管理方便，在 一个小试管中可得到大量群体。 3.遗传物质简单，便于遗传研究。仅有一条染色体。 4.便于研究基因突变。群体大容易检测到，无显隐性 ，基因都能表现性状。 5．便于研究基因作用。容易获得营养缺陷型。;第二节 噬菌体的遗传分析 ;1．烈性噬菌体 ;2. 温和性噬菌体 ;二、噬菌体的重组 T2噬菌体 h+感染B菌株，产生半透明斑。 h感染B和B/2菌株，产生透明斑 r+产生正常斑：小而边缘模糊 r产生突变斑：大而边缘清楚 h+r感染B菌株产生半透明大斑 hr+感染B和B/2菌株，产生透明小斑 ; h+r×hr+ 亲 型 重组型 h+r hr+ hr h＋r+ 半透明 透明 透明 半透明 大斑 小斑 大斑 小斑 rah+×r+h rbh+×r+h rch+×r+h 24% 12.3% 1.6% ra----h rb----h rc----h ;根据上述实验结果，有四种排列： ;第三节 细菌的遗传分析 一、转化 细菌细胞通过其细胞膜摄取周围供体 DNA片段，并通过重组整合到自己染色体中 的过程。 转化过程： （一）供体DNA附着 在受体细胞表面 ;影响因素： 供体DNA片段大小 不同细菌要求转化的片 段大小不同。肺炎双球菌要求800核苷酸对以 上；枯草杆菌要求1600核苷酸对以上。 供体DNA片段形态 供体DNA必需是双链。 供体DNA片段浓度 供体DNA片段数目越多 越容易发生转化，但不同细菌只能与特定数量 DNA片段结合 取决于细胞上接受座位数。 受体细胞生理状态 感受状态细胞才能发生 转化 DNA合成刚结束，蛋白质合成仍在进 行时的细胞。;（二）供体DNA进入受体细胞体内 外切酶或DNA移位酶降解其中一条单链，并释放 能量，将另一条单链拉入细胞体内。 ;（三）联会与整合 联会：外源DNA进入受体细胞后与受体细菌DNA 的同源区段发生联会，形成部分二倍体。 部分二倍体：细菌拟有性生殖过程中，外源DNA 与受体DNA同源区段联会，使受体细胞部分DNA 形成二倍体。 供体外基因子：部分二倍体中的外源DNA。 受体内基因子：部分二倍体中受体细胞的DNA。 ; ;部分二倍体发生交换只有偶数（双交换、四 交换）交换才有意义，既不破坏受体DNA的环 状结构，又将外源 DNA置换到受体染色 体中。而奇数交换 将受体环状DNA打开 成线性DNA，重组转 化子不能成活。 ; 细菌转化过程示意图;转化过程动态图;转化重组作图： 用一野生型细菌菌株提取出来的DNA转化一个不能合成丙氨酸（ala－）、脯氨酸（pro－）、精氨酸（arg－）的突变菌株，获得下列结果： ala+ pro+ ar