2012高二生物课件12基因工程的基本操作程序人教版选修3.ppt

第一步：获取目的基因方法： 1.从基因文库中获取目的基因。 2.利用PCR技术合成DNA 基因文库的构建模式图 PCR的过程 （1）以DNA 片段作模板，在 90℃ 高温下，分开成 为 单链DNA。 （2）以DNA 小段寡聚核苷酸做引物，在 50℃ 的温度下，找到可以配对的正链和负链，形成互补结合 （3）在 70℃ 高温下，合成一条与模板 DNA 单链（正链或负链）互补结合的DNA新链。 （4）以上三个步骤周而复始，即反应体系的温度从 90oC- 50oC- 75oC，目的基因的量不断增加 反应体系中经历：变性——淬火——合成——重复 。 结果：目的基因的量成指数形式扩增（2n) 由mRNA反转录形成cDNA mRNA DNA单链 DNA单链 RNA – DNA杂交分子 RNA – DNA杂交分子 单链DNA 单链DNA 双链DNA 第二步： 基因表达载体的构建 总结：表达载体需由哪几部分组成 复制原点 启动子 目的基因 终止子 标记基因 第三步：将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞 将目的基因导入动物细胞 将目的基因导入微生物细胞