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高三生物第一学期第一周课时B选修三现代生物科技专题.PDF
高三生物第一学期第一周课时B
选修三 现代生物科技专题
专题一 基因工程
1.1 DNA重组技术的基本工具(二 )
五、基因工程操作基本工具的高频考题
(二)筛选问题
Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,限制酶Pst Ⅰ、
EcoR Ⅰ和HindⅢ
目的基因插入青霉素抗性基因中,空白质粒,重组质粒,导入受体细胞
只含四环素的培养基——只导入空白质粒或导入重组质粒或含四环素抗性基因
例题8 :
含四环素和青霉素的培养基——影印到这个培养基,缺失的菌落导入的是重组质粒
只含四环素的培养基——没有受体菌成功导入质粒(空白质粒或重组质粒)
例题9 :我国基因工程药物的研制和生产发展迅
猛,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激
素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用
的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性
基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据上图回答
下列问题(限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ和HindⅢ切割
形成的末端均不相同):
(1 )过程②必需的酶是____________ ,过程④必
需的酶是____________。⑤过程中为提高成功率 ,
常用____________溶液处理大肠杆菌。
(2 )如果用限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ和HindⅢ对
质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三
种酶分别切割时,则形成的DNA片段共____________种 ,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的
比例是____________。
例题9 :我国基因工程药物的研制和生产发展迅
猛 ,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激
素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用
的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性
基因 ,Tetr表示四环素抗性基因。根据上图回答
下列问题(限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ和HindⅢ切割
形成的末端均不相同):
(3 )如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒
pBR322 ,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大
肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到
甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的
单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同
位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选____________的大
肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是____________。
(三)碱基对计算
例题6 :普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因
(GhMnaA2 ),能在纤维细胞中特异性
表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素
降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉
花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2
基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉
花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体
过程如下。请分析回答:
(1 )①和②过程中所用的限制性内切酶分
别是____________、____________。
(2 )基因表达载体除了图示组成外,至少
还有________________________等(至少答两个)。
例题6 :普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因
(GhMnaA2 ),能在纤维细胞中特异性
表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素
降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉
花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2
基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉
花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体
过程如下。请分析回答:
(3 )③过程中用酶切法可鉴定正、反义表
达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因
表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、
9.45kb四种长度的DNA片段,则用NotⅠ
酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长
度应是____________。
例题6 :普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因
(GhMnaA2 ),能在纤维细胞中特异性
表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素
降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉
花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2
基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉
花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体
过程如下。请分析回答:
(4 )④过程中利用农杆菌介导转化棉花细
胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA
的区段是__
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