实验9 人类ABO血型检查.ppt

* 实验9 人类ABO血型检查与复等位基因的遗传平衡 罗向东 江西师范大学生命科学学院xdluolf@163.com * 指导书: 实验十五(P50) 实验十六 (P53) * 一、实验目的 通过实验掌握人类类ABO血型的检测方法,进一步理解和掌握基因座位（locus）和基因位点（site）的关系，复等位基因、基因共显性概念 通过实验进一步理解Hardy-Weinberg定律的原理。 * 血液的组成是： 　　 血浆： 优良溶剂，含蛋白质、葡萄糖、无机盐、 代谢产物、 O2、CO2 血液　　　　　红细胞：含血红蛋白，容易和 O2和CO2结合 　　 血细胞　 白细胞：具免疫（淋巴细胞），吞噬机能 　　　　　　　血小板：止血，凝血 血型：指红细胞上所含抗原的不同，应用抗原与抗体的反应，产生凝集与否，对血型进行判断： 二、实验原理 * * 血型 基因型 抗原(红细胞上) 抗体(血清中) 血清 血细胞 AB IAIB A B — 不能使任一血型的红细胞凝集 可被O,A,B型的血清凝集 A IAIA IAi A ? 可使B及AB型的红细胞凝集 可被O及B型的血清凝集 B IBIB IBi B ? 可使A及AB型的红细胞凝集 可被O及A型的血清凝集 O ii — ? ? 可使A,B及AB型的红细胞凝集 不能被任一血型的血清凝集 人类ABO血型的表型和基因型及其凝集反应 输血时，红细胞的性质比血清的性质更为重要，因为血清中的抗体不仅可被不亲和的组织吸收，同时可被受血者的血浆稀释，使供血的浓度大大降低，不足以发生凝血反应。 * 输血原则： 同血型者可以输血； O型血者可以输给任何血型的个体； AB型的人可以接受任何血型的血液； AB型的血液只能输给AB型的人。 * 参试人员的手指毛细管血液两滴 三、实验材料 　　显微镜、载玻片、抗A、抗B、消毒药棉、70％乙醇、一次性采血针 四、仪器药品 * 1.在载玻片上划分两格，分别标明A与B，如下图： 2. 用70%酒精药棉消毒手指采血部位（一般为无名指末端），再用此药棉消毒一次性采血针； 3.用采血针刺手指，挤出血液；一滴血液滴在A处，另一滴血液滴在B处； 五、实验步骤 A B * 4.在A处滴加抗A标准血清一滴，在B处加抗B标准血清一滴； 5. 分别用采血针调匀，调匀一处血液后揩擦采血针，再调另一处； 6.两分钟内肉眼观察反应结果，或用最低倍显微镜观察其凝聚的情况，反之可能产生假凝集现象。 五、实验步骤 * 血型 抗A试剂 抗B试剂 A ＋ － B － ＋ O － － AB ＋ ＋ ＋：表示凝集反应；－：表示无凝集反应 五、实验步骤 * 7. 复等位基因遗传平衡的检验 本实验以人类ABO血型为例，说明平衡群体中3个复等位基因IA、IB、i基因频率的计算和平衡的检验。 设：复等位基因IA、IB、I的频率分别为p、q、r。 如果群体平衡,那么其表型、基因型及其频率满足下表 * 基因型 IAIA IAi IBIB IBi IAIB ii 观察的表型频率 A B (AB) O 预计的表型频率 P2+2pr q2+2qr 2pq r2 p+q+r=1 ?p2+q2+r2+2pq+2pr+2qr=1 * 按下列公式从实际观察得到的血型（表型）平率资料中分别计算p、q、r。 i基因频率 r=√ O IB基因频率　　q=1－√A+O 因为A’+O’=p2+2pr+r2=(p+r)2=(1－q)2 所以１－q=√A+O 则　　q=1－√A+O * IA基因频率p=1－√B+O 因为B’+O’=q2+2qr+r2=(q+r)2=(1－p)2 所以１－p=√B+O 所以　p=1－√B+O * 现以实例说明某次ABO血型调查结果与hardy—weinberg平衡相适合的程度。资料来自某城市随机抽样6000个中国人的ABO血型的调查，其分布及其相关计算如下表 血型　　　 A B AB O 总计 数目（O）　1920 1627 607 1846 6000 频率 0.320 0 0.2716 0.10116 0.30766 1 * 基因频率：r=√O=√0.30766 =0.55486 p=1－√B+O