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组织培养基本知识问答
1.有些植物在组培生根阶段会把大量元素和糖减半,我应根据什么来判断是否需要减半?答:在组培过程中,我们提起配方往往只局限于激素的配比和添加物的使用,其实对基本培养基的构成和培养条件(温度、光照、湿度、PH等)都属于配方的范畴。在这方面的调整主要是根据实际培养状况灵活调整。在生根阶段,试验证明培养基高渗透势或液体培养基有利于营养素和激素的运转,有利于根的发生和形成质量,因此大部分植物在生根过程需要调整基本培养基的组成。但具体需不需要应该通过对比试验确定。2.什么是滤纸桥生根?答:1)滤纸桥生根技术是分化苗直接瓶外生根技术,其作用主要是简化生根环节,提高炼苗成活率,降低组培成本,同时还可以对污染苗进行最大程度的利用。3.组织培养中出现黄化的原因有几种?答:黄化是指在组培过程中由于培养基成分、环境、激素、碳水化合物等各种因素引起的幼苗整株失绿,全部或部分叶片黄化、斑驳。这一现象在植物组织培养中比较常见,特别在部分木本花卉中较为常见,引起黄化的主要原因是培养基中Fe的含量不足;各矿质营养不均衡;培养环境通气不良,瓶内乙烯含量升高;激素配比不当;糖用量不足或长时间不转移糖已耗尽;PH值变化过大;培养温度不适;光照不足等。解决的方法是,首先在配制母液和培养基的制作过程中,要检查仪器设备是否准确,还要认真细致地核对每项称量的每一个环节;及时转接培养物;使用透气的封口膜以改善瓶内通气状况;适当调节pH值、激素配比和无机盐浓度;配制培养基时切记不要忘记加糖;控制培养室内的温度;适当增加光照;另外,在培养基中添加抗生素类物质如青霉素、链霉素、头孢霉素等,有时也会出现幼苗黄化现象,应适当减少用量或停止使用。4.人工种芽的形成标致是什么,怎样才能算是一个完整的人工种芽?答:一个完整的人工种子是由体细胞胚、人工胚乳和人工种皮三部分组成。它的优势在于:1、培养条件可以人为控制,省地省工,可直接播种。2、人工种子制作时,可加入营养物质、植物生长调节剂、固氮菌、杀虫剂等。3、以用于生产人工种子的体细胞胚,可以利用生物反应器大规模生产,效率极高。4、一些珍贵种苗或树种可以通过人工种子,加速其生产应用。存在问题:1、并非所有植物都能培育出大量高质量的体细胞胚。2、目前的人工胚乳和种皮还不够理想,不能有效防止微生物的腐蚀。3、人工种子的贮藏问题有待于进一步完善。5.在组培中胚状体在外部形态上是如何与愈伤组织区别的?答:大量实验证实,植物体细胞具有成胚的潜力,由体细胞形成的胚状体叫体细胞胚(somatic embryo)。一般情况,体细胞组织形成愈伤组织之后3周内,在愈伤组织上出现大量胚,这些胚是由愈伤组织外层细胞以及深部细胞起源的。在离体或活体条件下,体细胞经原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷胚期和子叶期等阶段形成的胚叫体细胞胚状体。从外植体或愈伤组织表面产生胚状体的情况较为常见。从愈伤组织向球形胚过渡的标志是细胞的活跃分裂形成一团致密的没有表皮层的细胞团结构,可以明显地与疏松的愈伤组织区分开。鉴别胚状体的标准:(1)胚状体具有极性,也就是说胚状体在发育的早期阶段,在其相反的两端分化,分别出现茎端和根端,是一种单极性结构。(2)在组织学上,胚状体的维管组织与母体植物或外植体的维管组织一般没有联系,其维管组织的分布呈“Y”字形。而根或芽的分化,里面长出原形成层束,与愈伤组织形成的或外植体中的维管组织往往相连。6.光照强度多少lx是怎么计算的?答:1)光照强度=光通量/单位面积。至于Lux的换算对很多人来说也是比较抽象。现推荐一种简单的换算方法。光是一种辐射能,故各种光源所发出的光能都有一定的强度。这种光能的强度,就叫作“光强度”。它一般以烛光为计算单位。即以点然一种特制的鲸油蜡烛,依它沿水平方向的发光强度作为基数--1烛光。现在所用的以电源发光的光源,其光强度的计算单位仍以烛光为标准,称作国际烛光。在习惯上我们称瓦特。25瓦特的电灯,其光强度等于25国际烛光。2)光照强度的换算实际上要用英尺烛光,但是我还没有找到英尺烛光和日光灯之间的关系公式。英尺烛光是距光源一米处每平方英尺的光照强度,可以说它是这样规定的:就是一个标准烛光(我不知道这样说对不对)在一米处一平方英尺的垂直面积上的光照强度是一英尺烛光。计算式:1标准烛光=10.76Lux3)因为光照强度和发光强度的单位换算中有都有“标准烛光”这一关系,为此,我认为完全可以用发光强度来推测光照强度的相关性。又因为同一标准的烛光,其在相同距离的光照强度应该也是一样的,而且日光灯的瓦数和国际烛光的发光强度是相同的,所以,英尺烛光也可以和日光灯的光照强度相同,也就是说等于日光灯的瓦数。例如130瓦的日光灯,在一米处的光张强度为30×10.76=322
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