第2章 蛋白质的一级结构.pptVIP

2005-01-20 XiongYanfei 这种缩合作用可反复进行，形成二肽、三肽、寡肽及多肽； 肽链中一个氨基酸单位称为一个氨基酸残基(residue)，一个氨基酸残基较游离氨基酸少一个水分子（末端除外）,平均分子量110； 肽链的大小可用所含氨基酸残基的总数表示或相对分子质量表示，大多数天然多肽含50~200个氨基酸残基，相对分子质量在5,500~220,00之间； 2.6.2 肽链是有方向性的(directional) 肽链的一端有游离氨基，称氨基末端（或N末端 N-terminal），另一端有游离羧基，称羧基末端（或C末端 C-terminal)； 肽链写法：游离α-氨基在左，游离α-羧基在右，氨基酸之间用“—”表示肽键。 2.6.3 所有肽链的共价主链结构都是相同的 肽链中的骨架结构是由 单位重复连接而成，称共价主链（main chain or backbone)； 2.6.4 肽链末端羧基、末端氨基及侧链基团可发生不同程度的解离，表现出重要的理化性质 在pH1～14范围内，主链上肽键氨基不发生解离，游离末端的-COOH和-NH2以及侧链R上的基团可发生不同程度的解离； 各基团解离程度及肽所带的总电荷取决于所处溶液的pH值； 对于指定的基团，其pH＜pKa时，不发生酸式解离，pH＞pKa时，发生酸式解离，pH= pKa时，解离与不解离各占一半，由此可确定肽链所带净电荷. 2.6.5 许多短肽具有重要的生物活性 ——天然存在的活性肽 作为神经递质、神经激素或神经调节物；如LHRH-类10肽(蛙的一种神经递质)，促甲状腺素释放因子，脑啡肽，内啡肽，强啡肽等 作为抗体：短杆菌肽A，短杆菌肽S等； 作为激素：胰岛素、胰高血糖素、促肾上腺皮质激素等； 作为防御性毒物：剧毒的鹅膏蕈碱、蛇毒、蛛毒等 谷胱甘肽（glutathione ，GSH） 2.7.1 多肽与蛋白质的概念不完全相同 The term protein broadly defines molecules composed of one or more polypeptide chains; The term polypeptide is used to define the chain exceeds several dozen amino acids in length (less than 50 amino acid residues); The terms polypeptide and protein are used interchangeably in discussing single polypeptide chain. 问题5：试简述蛋白质的重要生物学功能？ 2.7.2 根据蛋白质的组成、或含多肽链数目或形状可对蛋白质进行不同的分类 根据蛋白质形状可分为球状蛋白与纤维状蛋白： 根据含多肽链数目可分为单体蛋白和多体蛋白 应用：由于胶体溶液中的蛋白质不能通过半透膜，因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去; 2.8.2等电点沉淀和pH控制: 随着盐浓度的升高，如饱和或半饱和时，蛋白质溶解度逐渐降低，相互聚集而从水溶液中沉淀析出，这种现象叫盐析。 解释：大量中性盐的加入，使水的活度降低，原来的溶液中的大部分自由水转变为盐离子的水化水。降低蛋白质极性基团与水分子间的相互作用，破坏蛋白质分子表面的水化层。 常用的中性盐：（NH4)2SO4 特点：保持蛋白质的天然构象——蛋白质分离、提纯常用方法。 2.8.7 亲和层析 对某一种蛋白质来说，在某一pH时，它所带的正电荷与负电荷恰好相等，即净电荷为零，这一pH称蛋白质的等电点。 pH＞pI时，蛋白质带净负电荷，电场中移向正极 pH＜pI时，蛋白质带净正电荷，电场中移向负极 pH=pI时，蛋白质不带静电荷，电场中不移动。 蛋白质具有多个结构层次： 一级结构——二级结构、三级结构、四级结构 ——生物功能 蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列顺序——也称共价结构。 共价肽键是一级结构的唯一连接方式 多肽链一级结构决定着蛋白质的高级结构和功能 测定蛋白质分子中多肽链的数目； 拆分蛋白质分子中的多肽链； 测定多肽链的氨基酸组成； 分析多肽链的N末端和C末端（方法很多） 断裂多肽链内的二硫键； 多肽链断裂成肽段； 测定各个多肽段的氨基酸顺序； 确定肽段在多肽链中的次序； 确定原多肽链中二硫键的位置。 测得相对分子质量Mr 很多方法可用