无菌工艺验证培养基模拟灌装试验(葛均友).pptVIP

63 | Warning Letter – Placebo mediums should b be evaluated for their inhibitory effect on microor rganisms. Your response does not indicate that your firm uses beta-lactamase to inhibit the effect of antib biotic residue in the production line during proc cess simulation. 没有考虑可能存在的头孢残留对培养基中微生物的影响 | 国家大容量注射剂工程技术研究中心 | 影响。 64 | Warning Letter – Gases used during proc cess simulation should be evaluated for their inhib bitory effect on microorganisms. Your response states that the nitrogen used in the pro ocess simulation is removed by the test membrane d during filtration. 没有评估模拟过程中使用的气体（氮气）对微生物 国家大容量注射剂工程技术研究中心 65 | Any Ques stions？ 谢谢！ | Email Address：gejunyou@126.com 国家大容量注射剂工程技术研究中心 | 31 | 8、培养基模拟灌装实验的阳性对照 培养基阳性对照实验： 随机选取已经完成14天培养的灌装培养基样品，按照药典要求 – 常用枯草芽孢杆菌、白色念珠球菌或工厂特定菌作为阳性菌 – 将每个菌种准备含100cfu u/0.1ml的菌液，每个菌种接种2支 培养基样品，同时并平板计数（双份） – 对真菌在20-25°C下培养，对细菌在30-35 °C下培养，每天 检查，5天内需有生长迹象 国家大容量注射剂工程技术研究中心 I. 32 | MP 9、培养基灌封实验的合格标准 FDA、EU GMP 和中国新版GM 无菌附录： 灌封量5000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查，并重新验 证(3批)。 II. 灌封量为5000-10000瓶时，若有1瓶污染，视调查结果决定 是否需要重新进行1批培养基灌封试验；若有两瓶污染，必 须重新验证（3批），同时进行彻底调查。 III. 灌封量10000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查；若有两瓶 | 国家大容量注射剂工程技术研究中心 污染 瓶数 0 1 2 3 4 5 95% 置信 限值 3 33 | 培养基灌封实验的合格标准 PIC及SFDA研发注册标准：在95 5%置信限时污染率低于0.1%。 计算公式：污染率 = (95%置信限值)/(灌封容器数) × 100% 污染瓶数与95%置信限值间的关系 6 7 8 9 10 | 4.74 6.3 7.75 9.15 10. .51 11.84 13.15 14.43 15.71 16.9 6 国家大容量注射剂工程技术研究中心 菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖 1. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 34 | 10 0、举例-冻干工艺 方式A：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间 容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机 冻干机内部分抽真空，在室温放置一定的时间，不进行冷冻。 用无菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖 缺点:真空度不能过高，不能照成培养基沸腾。 方式B：以经稀释的培养基模拟冻干过程 容器内灌封好经稀释的培养基，以半压塞状态装入冻干机 模拟冻干过程，直到容器内的培养基大致达到正常浓度。用无 | 缺点：耗时长，需开发特殊的冻干程序，营养支持性不均一， 影响微生物的存活力。 国家大容量注射剂工程技术研究中心 1. 2. 35 | 冻干工艺 方式C：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间，不抽真空 或补充空气 容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机 冻干机不抽真空或者边抽真空边补充无菌空气。在室温放 置一定的时间，不进行冷冻。 注意：用培养基完全模拟冻干工艺非常困难( 如时间