荧光PCR检测原理.pptVIP

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* 一、荧光信号的检测 荧光标记信号的产生 荧光标记基团在某波长的激发光刺激下, 产生一个更长波长的发射光 FRET? 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET。 荧光信号 荧光染料 SYBR green——特异性结合双链,释放荧光信号 特异性荧光探针 Taqman双荧光标记探针 molecular Beacon荧光标记探针 荧光标记杂交双探针 Taqman 特异性荧光双标记探针 Taqman 5’→3’外切酶活性 Molecular beacon 荧光标记杂交双探针 二、典型的荧光PCR扩增曲线 阳性标本扩增曲线 阴性标本扩增曲线 Bio-rad iCycler扩增曲线 PE-5700扩增曲线 PE-7700扩增曲线 Roche LightCycler扩增曲线 三、Ct值 样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数 Ct值 *

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