221动物细胞培养和核移植技术.pptVIP

2.2 动物细胞工程 合作探究1 (一)动物细胞培养的过程: (一)动物细胞培养的过程： 3、动物细胞生长特性： 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、 易于贴附。 （二）动物细胞培养条件： 植物组织培养和动物细胞培养的比较 学习目标二：动物体细胞核移植技术和克隆动物 * 与生活的联系： 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 最基础的是 ——动物细胞培养技术 （一）学习目标： （二）学习重点： （三）学习难点： 2.2 动物细胞工程 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应 用前景。 3、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 1、动物细胞培养的过程及条件。 2、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 3、单克隆抗体的制备和应用。 1、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 2、单克隆抗体的制备过程。 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 学习目标一：动物细胞培养 就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理： 1、概念： 动物细胞培养的原理： 植物组织培养的原理： 细胞增殖 细胞的全能性 如何进行动物细胞培养呢? 阅读P44最后一段——P46第一段相关内容 注意关键词: 细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养 1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？ 2、如何将动物组织分散成单个的细胞？ 3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质 主要是什么成分？ 4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？ 5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增 殖？ 取幼龄动物的器官或组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 1、选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，这些细胞增殖 能力强，有丝分裂旺盛，分化程度低，容易培养。 2、分散成单个细胞 在进行动物细胞培养时，用 分散细胞，说明细胞间的物质主要是 。 （P50 思考与探究1） 蛋白质 胰蛋白酶 分散成单个细胞便于从培养液中获得营养，排出代谢废物，利于继续培养。 思考：1、为什么要将组织块分散成单个细胞培养？ 2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？ 能够用胃蛋白酶代替吗？ 控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质； 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近。 3、动物细胞培养能否最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体。 P44 （1）细胞贴壁： 将细胞悬液置于适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 （2）细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 （1）原代培养 通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 （2）传代培养 将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程称为传代培养。 相关概念： 4、动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 无限传代 胰蛋白酶 单个细胞 细胞悬浮液 加培养液 细胞株 遗传物质未改变 细胞系 遗传物质已改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制。 P49讨论2：用于核移植的供体细胞一般都选用传10代以内的细胞，想一想，这是为什么？ 提示：培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞核遗传物质可能会发生突变。而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 思考：体外培养的动物细胞需要什么条件？ ①无菌、无毒 的环境 ③温度和pH 36.5±0.5℃； 7.2-7.4 ④气体环境： 主要有O2和CO2（95% 空气 + 5%CO2 ） 保证细胞的正常生长增殖 ②营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无 机盐、微量元素、动物血清等。） ①无菌处理 ②添加一定量的抗生素 ③定期更换培养液 P46旁栏思考题 ：为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种营养，还含有其他活性物质，可以补充合成培养基中缺乏的物质，保证细胞的正常生长增殖。 培养目的 培养结果 相同点 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物