2012倍丰土壤检测部培训紫外-可见分光光度计.pptVIP

T6紫外可见分光光度计 ;第一部分 紫外-可见吸收光谱法的原理第二部分 紫外-可见分光光度计构造与类型第三部分 紫外-可见分光光度计的应用第四部分 紫外-可见吸收光谱分析的条件和影响因素第五部分 T6紫外可见分光光度计使用操作规程;;一、基本原理:光的选择性吸收;入射光 I0;;; 第二部分 紫外—可见分光光度计; 基本构造主要由 ;;;;;; (一)按仪器使用波长分类： ①真空紫外分光光度计（0.1-200 nm）； ②可见分光光度计（350-700 nm）； ③紫外-可见分光光度计（190-1100 nm）； ④紫外-可见-红外分光光度计（190-2500 nm）； （二）按仪器使用的光学系统分类： ①单光束分光光度计； ②双光束分光光度计 ③双波长分光光度计 ④动力学分光光度计; （１）单光束分光光度计 经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。;; ;;;;;;二、结构分析 判断所含官能团、有机化合物的同分异构体。 （例如：某一化合物在250-300nm有强吸收带，则表示存在苯环的特征吸收；若在210-350nm有强吸收带，则可能含有两个双键的共轭单位。） 三、纯度鉴定 根据在吸收光谱最大吸收峰的位置和峰形状、数量判断该物质的纯度。 四、定量分析 根据朗伯—比尔定律，物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。所以通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度，便可求得溶液的浓度和含量。紫外可见分光光度法不仅用于测定微量成分，而且用于常量组分和多组分混合物的测定。 ;定性分析与定量分析的基础;★同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。 ★同一物质的浓度不同时，光吸收曲线形状相同，最大吸收波长不变，只是相应的吸收度大小不同。 ★物质不同，其分子结构不同，则吸收光谱曲线不同，最大吸收波长也不同。 所以可以根据吸收光谱曲线对物质进行定性鉴定和定量分析。 ; 物质对光的吸收特征，可以用吸收曲线来描述。以入射光的波长λ为横坐标，溶液的吸光度A为纵坐标作图，得到的曲线即为该物质的紫外-可见吸收曲线或吸收光谱。 吸收曲线表明了物质对不同波长的入射光的吸收能力。;;A;;;（二）双波长分光光度法; ΔＡ＝A λ2 －A λ1 ＝（kλ2－kλ1 )b c 两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓度成正比。kλ1和kλ2分别表示待测组分在λ1和λ2处的摩尔吸光系数。;;设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs cx)。则： Ax = kb cx As = kb cs ΔＡ＝Ａx －Ａs =kb(cx － cs ）=kbΔc 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ。 吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度 Cx = Cs +Δc ;;;1.在土壤和植物分析中的应用 氮、磷、钙、镁、铁等。 2.污染物的成分及含量的测定 水、土壤、空气、植物、粮食中污染物的鉴定和定量 分析。如农药残留、大气中污染物的分析测定等。 3.动、植物生物成分的分析 动、植物脂肪酸的分析，蛋白质、氨基酸、核酸的测定等。 ;;;;;; ;;;;;;;;三、显色反应及其影响因素（M+R MR）;;;;;T6紫外可见分光光度计使用操作规程; 4.3 操作步骤;4.3 操作步骤;4.3 操作步骤;4.3 操作步骤; 4.4 日常保养;4.4 日常保养;仪器的维护;;;8.比色皿的使用方法 ① 拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。 ② 清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液（1???2）浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。每次做完实验时，应立即洗净比色皿，用干净绸布或擦镜纸擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防尘保存。 ③ 比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，避免硬的物品把透光面划伤，以保护透光面。;