重组DNA的技术应用.pptVIP

第40章、重组DNA技术 1. 目的基因的获取 2. 克隆载体的选择与构建 3. 外源基因与载体的连接 4. 重组DNA导入受体菌 5. 重组体的筛选 6. 克隆基因的表达 基本概念 基因（gene）：P219 基因组（genome）：P292 基因组学（genomics）： 研究基因组的结构、信息与功能的科学。 基因组计划：HGP——P440 后基因组 功能基因组 基因文库 基因组DNA文库 (genomic DNA library) cDNA文库 (cDNA library) 聚合酶链反应（PCR） Polymerase Chain Reaction 基本原理： 变性、 退火、 延伸 (二)克隆载体的选择和构建 质粒DNA 克隆载体 噬菌体DNA 病毒DNA (六)克隆基因的表达 原核表达体系——表达载体的标准： 1. 含有大肠杆菌适宜的选择标志 2. 具有能调控转录、产生大量mRNA的强启动子 3. 含有适当的翻译控制序列 4. 含有合理设计的多接头克隆位点 DNA克隆的基本过程 分：分离目的基因 切：对目的基因和载体适当切割 接：目的基因