选修1微生物的利用.pptVIP

目录 选修1　生物技术实践 第37讲　微生物的利用 本讲目录 回归教材?夯实基础 知能演练?轻巧夺冠 高频考点?深度剖析 易错辨析?技法提升 高频考点?深度剖析 考点一 无菌技术的知识归纳 1．灭菌原因：为了获得纯净的培养物，关键是防止外来杂菌的污染。 2．无菌操作的条件 (1)各种器皿必须是无菌的； (2)各种培养基必须是无菌的； (3)细菌转移操作的过程必须是无菌的。 3．三种常用灭菌方法的比较 灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌 时间 灼烧灭菌 接种环、接种针或其他金属用具 酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 直至 烧红 干热灭菌 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等 干热灭菌箱内，160～170 ℃ 1～2 h 高压蒸汽灭菌 培养基等 100 kPa,121 ℃ 15～30 min 4.避免被杂菌污染的方法 (1)注意灭菌操作原则，灭菌彻底，降低环境污染几率，手和实验服要清洁，减少操作时间，对污染源的改善考虑周到。 (2)注意微生物生长条件，如pH、渗透压、温度等。细菌喜中性偏碱的环境，喜蛋白质丰富的营养物质，喜37 ℃的温度；而霉菌喜中性偏酸的环境，喜糖类丰富的营养物质，喜25～30 ℃的温度。因此，可以根据不同微生物的“喜好”来减少污染。 1．大肠杆菌 (1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2．培养：实验中用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌。 考点二 大肠杆菌的培养与分离 3．分离(实验部分) 培养基灭菌 ↓ 倒平板 ↓ 接种 ↓ 划线分离 ↓ 培养观察 50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌 将固体培养基倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12 h 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿 培养皿倒置(盖在下面)，放在37 ℃恒温培养箱中培养12～24 h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落 4.菌液划线分离的方法 5．保存菌种 用接种环取出单个菌落，用划线法接种在斜面培养基上，37 ℃培养24 h后，4 ℃冰箱保存。 特别提醒 平板划线法中的注意事项 (1)取菌种之前及每次划线之前都需要将接种环灼烧灭菌,划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表： (2)从第二次以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 取菌种之前 每次划线之前 划线结束 目的 杀死接种环上原有的微生物 杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线后菌种数目减少 杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 1．实验原理：脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，利用尿素作为其生长的氮源。 2．实验目的：从土壤中分离出能利用尿素的细菌，了解它在生态平衡中的作用，并与LB全营养培养基做对照。 3．实验步骤： (1)制平板：在酒精灯火焰旁将LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒在两个培养基养皿中,超净台摇匀,平放至凝固。 考点三 分离以尿素为氮源的微生物实验剖析 (2)制备细菌悬液：将1 g土样依次稀释出10－2、10－3、10－4和10－5土壤稀释液，备用。 (3)用涂布分离法分离细菌：取10－4和10－5土壤稀释液，分别加到LB培养基和尿素培养基的培养皿中，再用刮刀将菌液涂布到整个平面上。 (4)培养：将培养皿倒置，在37 ℃恒温培养上24～48 h。 (5)观察：全营养培养基中有较多的菌落，而尿素为氮源的培养基平板中只有少量菌落。 选择培养基 特别提醒 (1)在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。 (2)在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高深度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。 (3)培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 考题链接 培养基的种类及灭菌技术 (2011·高考新课标全国卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原