PCR室内质量控制标准操作程序.doc

PCR室内质量控制标准操作程序 1．目的：随时了解并控制实验室检测的精密度变化。 2．适用范围：核酸扩增荧光定量检测实验室。 3．负责人：1 操作人：1 1 1 4．程序： 4．1血清质量控制品制备及操作 4．1．1质控品制备： 收集本室检测的临床样本，HBV DNA定量为106copies/ml的样本混匀，并分装于0.5ml的离心管中，每支110μl，编号后（如Qb0201-n），-20℃保存。 4．1．2 操作： 每次检测过程中将此分装的室内质控品与样本同时检测，记录此标本的检测结果；计算前10次检测结果的平均值作为本批质控品的靶值。 4．1．3如果使用商品化的质控品，按4．１．２要求执行。 4．2 室内质控图的使用方法 4．2．1 描点 a） 图中线为靶线，±2s为警告线，±3s为失控线。 对于同一批号的质控血清不论使用几个月，其空图均不变化。只要将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实际起止日期即可。 b） 每天将该批号质控血清按有关规定程序复融随同病人的标本同时检测。将日期、检测结果和操作者如实记录在图下方的相应位置，并按前面的方法画出图上的对应点，用直线将该点与前一天的点连接。 c）月底计算当月全部质控血清检测结果的、s和CV，并进行图形分析和小结，将质量控制图存入质控资料档案。 4．2．2 图形分析 a）如果在±3s线以外，则为失控，应立即报告有关负责人，迅速查找原因。必要时复测标本，然后方可发出报告，并将失控情况、查找过程及处理结果等详细记录。 b）如果在±2s线以外，或出现连续6点以上在一侧等规律变化，均应即使向有关负责人反映，并积极查找原因。但当天的检验结果一般可以发出。 4．2．3 通过观察图形的规律性变化进行误差分析，消除误差来源 a）曲线漂移：提示有系统误差，准确度发生了一次性的向上或向下改变。这种变化往往是由于一个新的情况引起的。如更换不同批号试剂，启用新批号的质控血清、操作人员的变换等。在找原因时，应重点注意“漂移”前后发生了那些变动的因素。 b）趋势性变化：向下或向上的趋势性变化表明检测的准确度发生了渐渐地变化。这种变化往往是由于一个逐渐改变的因素造成的。如质控血清的降解，试剂效价的降低等。 c）连续多点分布在靶值一侧：目前，一般认为质控血清的检测结果连续6天以上 出现在靶值同一侧，则应迅速查找原因，争取尽快使之回复围绕在靶值随机分布的状态。因为按照统计学原理，由纯随机误差造成的这种情况的可能性很小。连续6天以上出现在靶值同一侧可能性小于1.5％。因此凡出现连续6天以上出现在靶值同一侧者均有可能存在非随机误差因素。如结果与靶值偏离并不太大，不会给临床使用带来太大影响时，一般检验报告可以照常填发。 d）其他规律变化：（周期性等） 4．2．4 通过图形的资料对比进行误差分析，消除误差来源 a）每个月的月底将该月的全部质控血清检测结果的和s与该批测定的和s进行比较。如果发生了变化，说明准确度发生了变化提示有非随机误差存在。如果当月s不同则表明检测的精密度发生了变化。 b）将使用同一批号质控血清的CT值的和s按月份列出。如果逐月上升， 应考虑保存不当造成的试剂效价降低或质控血清本身出现降解。如果各月份基本一致而s逐月加大，则主要提示常规工作的精密度下降，应重点从操作、管理上找原因。 c）在数年中，把每个月的CV和失控规律列成表，可用作检测质量的历史性回顾及趋势分析。 5. 本文涉及以下图表： PCR室内质控记录表 室内质控图