第12章细胞的增殖与调控.pptVIP

第十二章 细胞的增殖与调控 第二节 细胞分裂 ●有丝分裂(mitosis) ●减数分裂(meiosis) 第三节 细胞周期的调控(Cell-Cycle Control) ●MPF ●细胞周期调控系统的主要作用 ●细胞周期检验点(Cell Cycle Checkpoint) ●细胞周期运转的阻遏(细胞周期运转的负调控) ●Cyclin-Cdk复合物的多样性及细胞周期运转 第一节 细胞周期(cell cycle)概述 ●细胞周期 ●细胞周期中各个不同时相及其主要事件 ●细胞周期长短测定 ●细胞周期同步化 ●特异的细胞周期 一、有丝分裂(mitosis) (一) 有丝分裂过程 (二) 与有丝分裂直接相关的亚细胞结构 (三) 与有丝分裂过程中染色体运动的动力机制 (一) 有丝分裂过程 ●前期(prophase) ●前中期(prometaphase) ●中期(metaphase) ●后期(anaphase) ●末期(telophase) ●胞质分裂(cytokinesis) (二) 与有丝分裂直接相关的亚细胞结构 中心体 动粒与着丝粒 纺锤体 (三) 与有丝分裂过程中染色体运动的动力机制 染色体整列 　Mad蛋白，Bub蛋白:与微管捕捉染色体有关的蛋白质 　“推拉”理论 染色体分离 　马达蛋白沿微管向极运动 胞质分裂(cytokinesis) ●胞质分裂开始于细胞分裂后期,完成于细胞分裂末期.胞质分裂开始时,在赤道板周围细胞表面下陷,形成环形缢缩,称为分裂沟(furrow).逐步加深,直到两个子代细胞完全分开. ●中间体(midbody) ●收缩环(contractile ring) 减数分裂(meiosis) ●减数分裂概念与过程 ●减数分裂的意义 ●减数分裂特点 ●脊椎动物配子发生过程 细胞周期 ◆概念： 细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分 完成所经历的一个有序过程。其间细胞遗传物 质和其他内含物分配给子细胞。 ◆细胞周期时相组成 ◆细胞周期时间 ◆根据增殖状况，细胞分类三类 细胞周期时相组成 Interphase: 间期，G1 phase，S phase，G2 phase M phase: 有丝分裂期(Mitosis), 胞质分裂期(Cytokinesis) 细胞沿着G1→S→G2→M→G1周期性运转，在间期细胞体积增大(生长)，在 M 期细胞先是核分裂，接着胞质分裂，完成一个细胞周期。 细胞周期时间 不同细胞的细胞周期时间差异很大 S+G2+M 的时间变化教小，细胞周期时间长短主要差别在G1期 有些分裂增殖的细胞缺乏G1、G2期 根据增殖状况，细胞分类三类 ·连续分裂细胞(cycling cell) ·休眠细胞(Go细胞) ·终末分化细胞 Go期细胞和终末分化细胞的界限有时难以划 分，有的细胞过去认为属于终末分化细胞，目前 可能被认为是Go期细胞。 细胞周期中不同时相及其主要事件 ◆ G1期 ◆ S 期 ◆ G2期 ◆ M 期 G1期 ·与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所 需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂类 等，同时染色质去凝集。 G2期 · DNA复制完成，在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子 M 期 ·M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主 要包括两种方式，即有丝分裂(mitosis)和 减数分裂(meiosis)。遗传物质和细胞内其 他物质分配给子细胞。 S期 ·DNA复制与组蛋白合成同步，组成核小体串珠结构 ·S期DNA合成不同步 细胞周期长短测定 ◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 ◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry) ◆缩时摄像技术， 可以得到准确的细胞周期时间及分裂间 期和分裂期的准确时间。 细胞周期同步化 ◆自然同步化，如有一种粘菌的变形体plasmodia， 某些受精卵早期卵裂 ◆人工选择同步化 ◆药物诱导法 ◆条件依赖性突变株在细胞周期同步化中的应用： 将与细胞周期调控有关的条件依赖性突变株转移 到限定条件下培养，所有细胞便被同步化在细胞 周期中某一特定时期。 人工选择同步化 ·有丝分裂选择法：用于单层贴壁生长细胞。优点是细 胞未经任何药物处理，细胞同步化效率高。缺点是 分离的细胞数量少。 ·密度梯度离心法：根据不同时期的细胞在体积和重量 上存在差别进行分离。优点是方法 简单省时，效率高， 成本低。缺点是对大多数种类的细胞并不适用。 药物诱导法 · DNA合成阻断法 ─ G1/S-TdR双阻断法：最终将 细胞群阻断于G1/S交界处。优点是同步化效率高， 几乎适合于所有体外培养的细胞