第5章荧光分析法与化学发光分析法.pptVIP

第5章 荧光分析法与化学发光分析法 5.1 荧光分析法 5.2 化学发光分析法 相关定义 特点 荧光分析法：灵敏度高、选择性好 化学发光分析法：灵敏度高；线性范围宽；分析速度快；仪器设备简单，不需要光源及单色器等；没有散射光及杂散光等引起的背景值。 5.1 荧光分析法 5.1.1 基本原理 5.1.2 影响荧光强度的因素 5.1.3 荧光分光光度计 5.1.4 分析方法 5.1.5 应用示例 5.1.1 基本原理 1．分子中电子的激发过程 2．分子荧光的产生 3．荧光光谱的类型和特征 1．分子中电子的激发过程 2.分子荧光的产生 振动弛豫 内部能量转换 荧光发射 外部能量转换 体系间跨越 磷光发射 3．荧光光谱的类型和特征 1）激发光谱和发射光谱 2）荧光光谱特征 1）激发光谱和发射光谱 硫酸奎宁的激发光谱（a） 及荧光光谱（b） 2）荧光光谱特征 （1）Stokes位移 （2）荧光发射光谱的形状与激发波长无关 （3）荧光光谱与激发光谱的镜像关系 蒽的激发光谱和荧光光谱 蒽的能级跃迁 与UV比较 相同点 λ区段：Vis-UV区 适用性：均可用于定性定量，多用于定量 定量方法：相似 样品性质、量：以液体为主、均少 分析时间：均快 操作难易程度：易 与UV比较 不同点 5.1.2 影响荧光强度的因素 1．荧光