生化需氧量检测作业指导书.doc

生化需氧量检测作业指导书 1.试剂及其配制 1.1氯化钙溶液（27.5g/l）:溶解27.5g氯化钙于水中，稀释至1L，盛于试剂瓶中。 1.2三氯化铁溶液（0.25g/l）:溶解0.25g三氯化铁于水中，稀释至1L，盛于试剂瓶中。 1.3硫酸镁溶液（22.5g/l）:溶解22.5g硫酸镁于水中，稀释至1L。盛于试剂瓶中。 1.4磷酸盐缓冲溶液（pH≈7.2）：溶解8.5g磷酸二氢钾，21.75g磷酸氢二钾，33.4g磷酸氢二钠和1.7g氯化铵于约500ml水中，稀释至1L。此缓冲溶液pH为7.2，不需再做调节。 1.5测定溶解氧所需试剂及其配制。 2.分析步骤 2.1稀释水的制备 在20L玻璃瓶中加入一定体积的睡，经过8h~12h曝气后，使溶解氧接近饱和，盖严静置，备用。使用前于每升水中各加1ml磷酸盐华纳冲溶液、1ml硫酸镁溶液、1ml氯化钙溶液和1ml三氯化铁溶液，混匀。 2.2水样采集和培养 水样采集和培养按一下步骤进行： a)水样采集后应在6h内开始分析，若不能，则在4℃或4℃以下保存，而且不得超过24h，并将贮存时间和温度与分析结果一起报告； b)对未受污染海区的水样，可以直接取样。分装样品时，虹吸管的一头要插入培养瓶的底部，慢慢放水，以免带入气泡。直接测定当天水样和经过五天培养后水样中溶解氧的差值，即为五日生化需氧量 c）对于已受污染海区的水样，必须用稀释水稀释后再进行培养和测定。水样稀释的倍数是测定的重要关键。稀释倍数的选择可根据培养后溶解氧的减少量而定，剩余的溶解氧至少有1mg/l.一般采用20%~75%的稀释量。在初次作时，可对每个水样同事做2~3个不同的稀释倍数。 3.记录与计算 将每种水样测定结果及时记录在表中，按式（68）计算五日生化需氧量： BOD5=[(D1-D2)-(D3-D4)×f1]÷f2…………………………(68) 式中： BOD5——五日生化需氧量，单位为毫克每升； D1——样品在培养前的溶解氧，单位为毫克每升； D2——样品在培养后的溶解氧，单位为毫克每升； D3——稀释水灾培养前的溶解氧，单位为毫克每升； D4——稀释水灾培养后的溶解氧，单位为毫克每升； f1——稀释水（V3）在样品(V4)中所占的比例； f2——水样(V4)在稀释水(V3)中所占的比例。 其中：f1=V3/(V3+V4); f2=V4/( V3+V4)