第三章 紫外-可见光谱法2.pptVIP

第三章 湖南中医药高等专科学校 药学系药物化学教研室 蒋梅香 1 2 3 主要内容 紫外-可见分光光度法理论基础 紫外—可见分光光度计 实用分析技术 1.下列四个电磁辐射区域中能量最大的是( ) A.红外区 B.可见光区 C.紫外光区 D.X射线区 2.紫外吸收光谱谱图又称紫外吸收曲线,是以(　　 )为横坐标；以（　　）为纵坐标。 3.分子中价电子的跃迁类型有(　　 )， (　　 )， (　　 )， (　　 )；不饱和基团常见的跃迁类型为(　　 )，含杂原子的不饱和基团常见的跃迁类型为(　　 )。 4.化合物共轭结构延长，吸收峰会向(　　 )方向移动。 复习题 5.按照朗伯-比尔定律，浓度C和吸光度A之间的关系应该是一条通过原点的直线，实际上容易发生线性偏离，导致偏离的原因有（ ）和（　　 ）两大因素。 复习题 一、仪器主要部件 UV-VIS仪示意图 第二节 紫外-可见分光光度计 0.57 光源 单色器 吸收池 检测器 信号处理及显示 光源 第二节 紫外-可见分光光度计 光源：发射强度足够、均匀、稳定、连续的复合光。 可见光区：钨灯，卤钨灯(320～1000nm) 紫外区：氢灯，氘灯(150～400nm) 氙灯：(200～800nm) 紫外、可见光区均可用作光源 氙灯 氢灯 钨灯 光源 光源 第二节 紫外-可见分光光度计 单色器 入射狭缝 准直透镜 棱镜 聚焦透镜 出射狭缝 白光 红 紫 λ1 λ2 800 600 500 400 将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 M1 M2 出射狭缝 光屏 透镜 平面透射光栅 光栅衍射示意图 原理： 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。 波长范围宽, 色散均匀, 分辨性能好, 使用方便 第二节 紫外-可见分光光度计 吸收池 又称比色皿：用于盛放样品溶液的器皿。 光学玻璃池：可见光区； 石英池：紫外区、可见光区； 第二节 紫外-可见分光光度计 吸收池 吸收池的正确拿放、清洗、在仪器中的放置位置请观察视频：比色皿的注意事项。 光电管 光电倍增管 检测器 又称探测器：利用光电效应，将光能信号转换成电信号的元件。 光电管、光电倍增管 测量光电流的读数装置。 检流计： 数字显示： 数字(显示)打印： 72型 722型 756型 信号处理与显示器 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 二、类型与工作原理 第二节 紫外-可见分光光度计 1.单光束分光光度计 第二节 紫外-可见分光光度计 二、类型与工作原理 1.单光束分光光度计 第二节 紫外-可见分光光度计 二、类型与工作原理 1.单光束分光光度计 第二节 紫外-可见分光光度计 二、类型与工作原理 1.单光束分光光度计 二、类型与工作原理 光源 单色器 吸收池 检测器 光束分裂器 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵 敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂， 价格较高。 2.双光束分光光度计 光路1 光路2 第二节 紫外-可见分光光度计 2.双光束分光光度计 二、类型与工作原理 第二节 紫外-可见分光光度计 2.双光束分光光度计 二、类型与工作原理 第二节 紫外-可见分光光度计 二、类型与原理 2.双光束分光光度计 三、分光光度计的操作步骤 观看722型分光光度计的操作演示视频，学习紫外-可见分光光度计的使用； 第二节 紫外-可见分光光度计 三、分光光度计的操作步骤 1.接通电源，仪器预热30分钟。 2.调节波长至测定所需波长值。 3.“0”点校正：按“功能键”切换至“T模式”，打开试样室盖，转动“调0%键”，显示器上显示“0.00”。 4.调“100%”：“T模式”，打开试样室盖，将参比（空白）样品放入样品架，拉动样品架拉杆使其进入光路，转动“调100%键”，显示器上显示“100.0”。 5.清洗吸收池，准备样品。 6.测定样品吸光度A：按“功能键”切换至“A模式”，将样品放入样品架置于光路中，测A，记录。 6.分光光度法种类很多，但分光光度计都是由下列主要部件组成的：①.（ ）②.（ ）③.（ ）④.（ ） ⑤.（ ） 7.紫外-可见分光光度计提供可见光的光源有（ ）和 （ ）；紫外光的光源有（ ）和 （ ）。 8. 紫外光区测定用的比