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* Firstly, I would like to give some some background information of FISH. FISH is a process which vividly paints chromosomes or portions of chromosomes with fluorescent molecules It can identify the presence and location of a region of DNA within morphologically preserved chromosome preparations, then can identifies chromosomal abnormalities It is often used during M phase but is now used on interphase as well * M-FISH with chromosome banding specific probes * 8.间期FISH 三、 FISH优点( Advantage): less labor-intensive method for confirming the presence of a DNA segment within an entire genome than other conventional methods * FISH - a process which vividly paints chromosomes or portions of chromosomes with fluorescent molecules identify the presence and location of a region of DNA within morphologically preserved chromosome preparations, then can identifies chromosomal abnormalities often used during M phase but is now used on interphase as well * 四、FISH在医学中的应用举例 1、用已知探针检测未知CS畸变 * 2、用显微切割方法检测未知CS畸变 显微切割→PCR →CS特异探针 池(黄色荧光) →与正常人CS杂交 (例:2号染色体某段发黄色荧光) 结果? * 3、产前诊断 例:检测间期细胞 内DNA分子数 例:21三体 例:18三体 * 4、植入前诊断 * Preimplantation Genetic Diagnosis (PGD) * 图示1例13/14罗式易位携带者的胚胎植入前FISH诊断 资料:一对6年不育,女,32岁,cs正常,男34岁,核型:45,XY,t(13;14)(q10;q10),并伴少、弱精。 采用单精子卵泡浆(intracytoplasmicsperm injection,ICSI)辅助授精,胚胎发育到3天6-8细胞期取出一个细胞进行双色FISH检测。 参图:用13q和14q探针,见核中2个13号(绿色)和2个14号(红色)信号细胞,表明? * 移植后18周做羊水细胞CS检查 * PGD 5、肿瘤诊断 肿瘤诊断探针 检测间期细胞内DNA分子数 肿瘤细胞内有癌基因扩增 * * 肿瘤诊断 * 慢性粒细胞白血病 * 慢性粒细胞白血病 * 慢性粒细胞白血病 * 6.微小染色体畸变检测 * Microdeletion 7.遗传病诊断 (图) 例1: 家系1 FISH结果 用Xcs着丝粒探针 (绿色)和DMD exon46探针(红色) 杂交。 图示DMD男患者FISH 结果:只有Xcs着丝 粒绿色信号,无DMD exon46红色信号, 说明? * 7.遗传病诊断 (图) * 图示:DMD男患者姐姐2条Xcs均有DMD Exon46信号(红色)。 表明? 7.遗传病诊断 (图) * 图示:DMD男患者妹妹只有1条Xcs上有DMD Exon46信号。 表明? 7.遗传病诊断 (图) * 例2: 家系2FISH结果 在DMD患者母亲1/3淋巴细胞中仅有1条Xcs上有DMD Exon46杂交信号,另一条上无。 7.遗传病诊断 (图) * 图示:在DMD患者母亲2/3淋巴细胞中在2条Xcs上有DMDExon46杂交信号。 A和B结果表明? 7.遗传病诊断 (图) * 例3: 图示1复杂易位患者FISH结果(该患者致妻流产3次) 核型:46,XY,t(5;20;16)(q35;p13;q21) 三色FISH(5q绿色;1
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