微生物生理学-绪论.ppt

微生物生理学研究策略概述 物质的分离纯化技术也是多种多样的。蛋白质类物质要使用蛋白质的分离纯化技术，如盐析、分子筛、离子交换层析、电泳和亲和层析等。化合物的分离技术有有机萃取、蒸馏、层析等。每种技术的使用均要根据研究目标而定。抗虫抗病的研究也有多种，要根据要求和实际的技术水平合理设计，达到既要说明问题，又要经济使用。 对于特殊酶和活性物质要进行分离纯化；对于抗病抗虫菌，要进行进一步的抗病抗虫研究。 这类项目有时还要求对菌种进行选育。选育是在得到目标菌之后进行的，是对菌株进一步诱变，从中得到性状稳定优良的菌株。关于诱变我们会在以后的章节中讲到。 有害微生物的快速鉴定和检测 微生物生理学研究策略概述 这类项目在动植物检疫、食品安全检测和环境检测中经常遇到。主要是针对一些严重危害人类健康、威胁食品安全的微生物，如肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱、炭疽杆菌、鼠疫杆菌、金黄色葡萄球菌等。关于这些菌的快速鉴定方法很多，其主要原理是根据这些菌的特性，通过一定的技术手段，快速地与其它细菌区分。 根据鉴定原理，大体可将这些鉴定方法，归为三类：细菌学鉴定、免疫学鉴定和分子生物学鉴定。 细菌学鉴定：主要根据观察这些菌的培养特性、形态特性、生理生化特性等快速地与其他细菌区分开来。 微生物生理学研究策略概述 免疫学鉴定：主要根据这些细菌特有的抗原抗体反应，将其与其它细菌区分开来。 分子生物学鉴定：主要根据PCR扩增这些细菌特有的基因序列，将其与其它细菌区分。 不论使用何种方法，其核心均是寻找这些菌的特殊性，同时要求要快速，因此，此类型课题设计的关键是特异和快速。 微生物某些生理功能的研究 在目前分生物学技术迅猛发展的条件下，简单的对微生物某些生理功能的描述已经是非常肤浅的，需要更深入地了解这些生理功能产生的机制。微生物的一切生理现象都是由基因控制的。因此，研究微生物生理现象，就是探索相关基因功能的过程。 微生物生理学研究策略概述 采取正向遗传学的思维，从基因、蛋白质水平开展工作，是常用的策略。 1. 诱变处理野生菌株，并筛选获得相关的突变菌株，分析研究这些突变菌株生理生化性状及对相应生理功能的影响。其中，突变菌株的筛选方法，主要根据所研究的生理性状设计。 2. 采用一定的技术手段，获得相关的基因，并通过遗传互补，分析确定基因的功能。获得基因有多种方法，不同的基因往往采用不同的方法。 3. 构建蛋白表达载体，分离纯化基因的蛋白质产物。体外进行相应的酶学研究。同时采用定点突变技术，对蛋白产物的有关氨基酸位点进行突变，分析蛋白的活性中心。通过蛋白质结构生物学的研究，解析蛋白质结构与功能的关系。 微生物生理学研究策略概述 目前已经有大量的微生物基因组测序完成，因此，对微生物生理功能的研究，也可以采用反向遗传学的策略。 1. 根据基因注释和其它物种的研究工作，选取感兴趣的基因。采用PCR扩增技术获得基因。 2. 根据基因组序列，定点敲除细菌基因组中的相关基因，分析研究突变菌株的生理生化特性。 3. 遗传互补突变菌株，分析基因可能的生理功能。 4. 同时体外研究基因产物蛋白质的酶学及结构学特性。 微生物生理学 授课教师：王海洪 联系方式办公地址：生命科学学院 北楼 211 微生物生理学及其研究方法 教学内容与教学安排 微生物生理学简介 微生物生理学内容 以微生物为研究对象，研究微生物细胞结构和功能，物质代谢和能量代谢，微生物生长发育以及微生物与其他生物及环境相互作用等生命现象的科学。 主要内容 微生物细胞的化学组成和结构 微生物营养 微生物代谢与调控 微生物基因表达与调控 微生物分化与发育 微生物与其它生物及环境相互作用 微生物细胞的化学组成及结构 细胞壁、细胞膜、细胞质及其附属物的化学组成、结构特点、形成机制和生理功能等 微生物的营养 微生物的营养类型，微生物对物质的利用及其吸收的方式 微生物代谢与调控 物质的合成代谢、分解代谢和代谢调节与控制等。 微生物代谢与调控 能量代谢，包括氧化磷酸化、光合磷酸化。有氧呼吸、无氧呼吸、发酵。 环式光合磷酸化、非环式光合磷酸化和紫膜光合磷酸化。 微生物基因表达与调控 DNA复制、mRNA转录、蛋白质翻译及基因表达调控 微生物的分化与发育 微生物分化和发育的过程、机制及其调控 微生物与其它生物及环境相互作用 微生物感染与动物免疫，致病机理与疾病防治。 微生物与其它生物及环境相互作用 微生物对环境的适应及其应对机制，特别是逆境的应对机制。 微生物生理学研究的意义 通过研究微生物的生命活动规律，发掘微生物资源，充分利用微生物的有益作用，消除其有害影响，造福人类。 微生物与人类生活 人类生活离不开微生物。日常生活中的许多食品是通过微生物的作用加工而成的，有些甚至直接以微生物为食物。 微