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石油污染土壤的生物修复技术 当今世界,石油已成为人类最主要的能源之一,大量的石油及其加工品进入环境,造成环境的石油污染,给人类乃至整个生物圈带来危害,从而成为世界性的环境问题。在对石油污染治理的研究中,生物修复作为一项潜在的高效、低成本的清洁技术正日益受到重视。近十余年来,国际上对生物修复的研究更加活跃,有些国家已将此技术用于污染土壤的实际修复,并取得了显著的成果。 阿尔伯塔省的焦油砂矿面积达14.1万平方公里,石油储量位居全球第三,20%的焦油砂便可提炼出1740亿桶石油。 虽然造成可怕的环境破坏,但面对巨大的经济利益,加拿大政府很难对开采焦油砂说“不”。据估计,2010年至2035年的焦油砂开采有望每年为加拿大的GDP贡献2.3万亿加元,同时提供63万个就业岗位。 是指原油和石油产品在开采、运输、储存以及使用过程中,进入到土壤环境,其数量和速度超过土壤的自净作用的速度,打破了它在土壤环境中的自然动态平衡,使其累积过程占据优势,导致土壤环境正常功能的失调和土壤质量的下降,并通过食物链,最终影响到人类健康的现象。 土壤石油污染来源 溢油和泄漏; 污水灌溉; 油页岩矿渣堆放; 大气沉降; 药剂等的施用。 石油污染土壤的影响危害 对土壤理化性质的影响; 对土壤微生物的影响; 对土壤酶的影响; 对农作物的影响。 土壤石油污染生物修复的主要类型 原位生物修复 受污染的土壤不做搬运或输送而在原位污染地进行的生物修复处理,其恢复过程主要依赖于被污染地自身微生物的自然降解能力和人为创造的合适降解条件。 异位生物修复 将受污染的土壤,搬动或输送到它处进行的生物修复处理,这里的搬动和输送是有一定限度的,而且更强调人为控制和创造更加优化的降解环境。 (1) 存在具有代谢活性的微生物; (2) 有较大的降解速率,并能将污染物浓度降低到 符合环保标准; (3) 过程中生成的中间产物必须没有毒性; (4) 污染场地必须不含对降解菌种有抑制作用的物质; (5) 污染物必须能够被微生物利用; (6)污染场地的条件必须有利于微生物生长并保持活性; (7) 技术费用必须尽可能低。 微生物修复 植物修复 植物—微生物联合修复 利用植物及其根际微生物共存体系净化土壤中有机污染物。大部分植物根上都有菌根菌生长,菌根菌和植物共生具有独特的代谢途径,可代谢自生菌不能降解的有机物。 石油类污染物降解基因工程菌的构建及应用 早在20世纪70年代,Chakrabayty在同一菌株中植入降解乙烷、辛烷和癸烷,降解二甲苯,降解萘和分解樟脑的4种假单胞菌的不同质粒,由此得到的工程菌具有超常规的能力,能够同时降解脂肪烃、芳烃、萜和多环芳烃,且降解石油的速度快、效率高,但质粒容易丢失或转移,遗传稳定性差。 李尔炀等采用染色体DNA转化原生质球的方法,构建了一株处理含PTA(对二苯甲酸)废水的工程菌LEY3。该菌能同时降解PTA、萘、苯甲酸、十六兢、乙二醇和甲醇6种化合物。用该菌对含PTA 生产废水作降解试验,COD 的去除率达66% - 91%。但供体基因进入细胞后随机整合到受体染色体上,导致各供体基因所获启动子活性不同,由此造成各基因之间表达强度不同,宏观上表现为对6种化合物降解率不同。 宋绍富等采用原生质体融合技术,将一种耐高温(72℃)、耐盐(30%NaCl)、耐酸碱(pH5-9.4),并可利用原油为碳源代谢生物表面活性剂的芽孢杆菌属菌Ⅰ和另一种为可在30℃利用糖蜜代谢水不溶性多糖聚合物的肠内杆菌属菌JD 融合,后将得到的融合子进行多次传代培养优选,最终获得了9株遗传性状稳定和代谢多糖性能优异的融合菌。但受融合子的耐酸性能改进不大的影响,与JD 亲本菌比较接近,只能在pH为6-10的环境中产生多糖。 宋永亭将烷烃单加氧酶基因slad A 克隆到质粒pSTE33上,并将重组质粒通过电击转化导入嗜热脱氮土壤芽孢杆菌中,得到了基因工程菌SL-21。该工程菌具有嗜热功能,并且对原油降解效果明显。但烷烃单加氧酶基因slad A 在不同的基因工程菌株中表达的效率不同,且质粒的遗传稳定性有待进一步研究。 基因工程菌的构建及其应用发展趋势与展望 彻底搞清基因工程菌遗传的稳定性。 深入研究基因工程菌的安全性。 利用生物信息技术探究基因工程菌的降解机理。 * * 前 言 2012年全球石油生产与消费排名前10位国家 土壤的石油污染 原位处理简单,经济,但处理时间长。在长期的处理过程中,污染物可能
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