流式细胞术的原理和应用.PPT

一、免疫学检测的基本原理 抗原与抗体反应的特异性是各种免疫学检测技术的基本原理 二、细胞因子检测方法 细胞因子的临床意义 常规测定法 胞内细胞因子检测方法 细胞因子检测的主要临床应用 （一）细胞因子的临床意义 细胞因子与疾病：正常情况下，细胞因子表达和分泌受机体的严格调控，在病理状态下细胞因子会出现异常性表达，表现为细胞因子及其受体的缺陷，细胞因子表达过高，以及可溶性细胞因子受体的水平增加等。 细胞因子与治疗：重组细胞因子做为生物应答调节剂。已批准生产：IFN-α、β、γ，Epo，GM-CSF，G-CSF，IL-2，正在进行临床试验的：IL-1、3、4、6、11，M-CSF，SCF，TGF-β等 （二）常规检测方法 分子生物学测定法 生物活性检测法 免疫化学测定法 1.分子生物学测定法 是测定细胞因子mRNA的表达水平，主要有两种方法： 分子杂交技术 多聚酶链反应技术（PCR） 分子杂交技术 制备细胞因子的基因探针； Northern 杂交或细胞原位杂交； 优点：高度敏感和高度特异； 缺点：操作较繁琐 测定结果只能代表细胞因子基因的表达，而不能代表活性细胞因子的水平。 多聚酶链反应技术（PCR） PCR（polymerase chain reaction)技术，是一种高效的基因体外扩增技术； 将细胞因子产生细胞的RNA提取出来，再经逆转录合成c