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第三章 常用仪器分析技术（二） ? 光谱分析法概论 ? 紫外-可见分光光度法 ? 荧光分光光度法 ? 原子吸收分光光度法 荧光分光光度法 一、基本概念 1. 光致发光 有些物质受到光照射时，除吸收某种波长的光之外还会发射出比原来所吸收光的波长更长的光。 最常见的光致发光现象是荧光和磷光。 2. 荧光（fluorescence） 物质在吸收光能之后产生的一种发射光，即物质分子接受光子能量被激发后，从激发态返回基态时发射出的光。 当物质分子吸收了一定波长的紫外光能后，基态电子跃迁到第一激发态，处于激发态的电子首先以无辐射方式下降到第一激发态的低能级，而后再回到基态时，所发射的光即荧光。 3. 荧光分光光度法 利用物质的荧光现象而建立的分析方法。 根据物质的荧光强度进行含量测定。 属于分子发射光谱法。 优点： 灵敏度高，选择性好，检测限达10-10g/mL，甚至10-12g/mL，比紫外-可见分光光度法低3个数量级以上。 局限性 二、基本原理 定量的依据 荧光强度与荧光物质的浓度呈线性关系。 F=KC（不遵循比尔-朗伯定律） F 荧光强度 C 荧光物质的浓度 K 常数 F与物质吸收光能的程度(I-I0) 和物质产生荧光的效率(Φ)有关 Φ=发射荧光的光子数 / 吸收激发光的光子