REACH法规第四卷译稿-16.docVIP

B．13 / 14. 诱变(性)：利用细菌进行的回复突变测定 1. 测定方法 这一测量方法是the OECD TG 471（经济合作与发展组织热重量分析法）的重复，细菌的反向突变测定 (1997)。 1.1. 引言 细菌的反向突变测定利用需求氨基酸的沙门氏typhimurium菌属和埃希氏大肠杆菌的氨基酸性的必须的应变来发现来检测点突变, 其包括少数DNA碱基的置换、增加或缺失替换附加或划除一到几个DNA 基对 (1)(2)(3)。细菌反向突变测定的原则是它它检测突变，这些回复突变出现在测试菌株中并且修复细菌合成一种基本氨基酸的能力发现能恢复在测定应变中呈现的突变和复位细菌的功能能力以便综合一必要的氨基酸的突变。回复突变菌株通过它在缺乏氨基酸的培养基中的生长而得到检测，而它的父系对这种氨基酸是必需的基因型细菌通过在无被父系测定应变要求的氨基酸环境下生长的能力被发现。 点突变是许多人类遗传性疾病的成因并且有关于在致癌基因和肉细胞的肿瘤抑制基因中的点突变与人类和动物样品样品的肿瘤形成有关的实质性的证据。细菌反向突变测定是迅速快速, 廉宜和相对地容易的实施方法。大部分测定应变试菌株有使许多特征，折兑它们检测突变变的更敏感，这些突变包括在回复位点DNA序列的响应它们对包括一些在回复位上、增长细胞浸透性到大分子和除去DNA修复系统或者有错误倾向的DNA修复系统增加情况下响应DNA 序列的突变的发现更灵敏，增加细胞对大分子的透性，消除DNA修复系统的正常功能而增加错误倾向的DNA修复过程。测试菌株的特征能对遗传毒性的试剂引起的突变类型能提供一些有用的信息。测定应变的特征能提供一些关于被神经毒性 药剂衰减的突变类型的有用信息。为大范围结构种类而设的一个非常大的结果实验数据库可用于细菌反向突变测定并且已确立的方法学已经为测定不同的物理化学药品包括挥发性的化合物而被发展。 见描述引言部份B. 1.2. 定义 回复突变测试是利用在沙门氏typhimurium或埃希氏大肠杆菌中测试氨基酸（分别是组氨酸和色氨酸）需求的菌株通过突变变成不在需求外源的氨基酸的反向变化测定发现在氨基酸性的必须的应变中的突变(组氨酸或色氨酸，分别地) 生产一独立与外部提供氨基酸的应变。 基本碱基对替换诱导突变是能导致DNA碱基改变的突变。有机体突变物质是引起在 DNA 方面的基本改变的药剂。在一个恢复测定中这一变化可能在最初的突变位置发生, 或者在细菌基因组的第二位置。 移码的诱导突变是能够有机体突变物质是引起DNA中一对或者更多的基对增加或缺失，从而改变了RNA的读码结构的突变。附加或划除的药剂，如此变更 RNA 的读数结构。 1.3. 初始条件 细菌反向突变测定利用原核细胞，其在很多方面不同于哺乳动物细胞在如摄取，新陈代谢，染色体结构和DNA修复过程中的因素。在体外 引导下的测定一般需要利用新陈代谢活化作用的外胚胎资源. 在体外（微晶）下的新陈代谢活化活性系统不能够完全地模仿模拟在哺乳动物活体体内条件下的的系统哺乳动物。因此测定不能提供关于测试物质对哺乳动物物质性的诱导突变和潜在致癌的直接信息有机体突变的和致癌的潜力。 细菌反向突变测定被广泛应用于遗传毒性活性、特别是点突变诱导的活性的广泛测试。足够多的实验数据显示很多化学物质在测试中显示阳性，在其它测试中也显示诱变活性。有一些具有诱变活性的化学物质在本测试中没有被检测出来，这些缺陷可以归咎于作为一个为神经毒性作用尤其为点突变诱导作用的初始的掩体被普遍采用。一个广泛的实验数据库展示了在这个测定中很阳性的并说明在其他的测定中诱导有机体突变活动的许多化学药品。有在测定中未被发现的诱导有机体突变药剂的例子;这些缺点的原因能归到终点观测测试的特性，新陈代谢活化作用的不同，或不同的生物药效的不同中。另一方面，提高细菌反向突变测定的敏感因素能导致诱导有机体突变物质活动的过度评估。 细菌反向突变测定不可能不适用用在化学药品某一级的评估，例如高度杀菌化合物 (例如，某抗生素) 和那些被认为（或已知的）明确地妨碍哺乳动物样品的细胞复制系统 (例如，一些局部异构酶抑制剂和一些核苷类似物)。在此情况下，哺乳动物样品的突变测定可能是更合理。 虽然在此测定中很阳性的许多化合物是哺乳动物样品的致癌物质,相互关系不是绝对的。它依赖于化学药品级并且有不被此测定发现致癌物质因为它们行动超过其他的非 神经毒基因毒性的机制或在细菌的细胞中绝少的机制。 1.4. 测定方法原则 细菌细胞的悬浮液接触于测试物质存在或存在的缺少外生新陈代谢活化系统的测定中。在平板测试方法中镀层结合法中，这些悬浮液同叠琼脂混合和立即被镀涂布在最小的培养基之上。在预孵化方法中，处理好的混合物被孵化并且然后和琼脂混合再涂布到在电镀在最小的培养基上前的同叠琼脂混合。对此两项技术而言，在经二