Q_NDFF 004-2019刺激隐核虫感染大黄鱼的攻毒实验操作规范.pdf

Q/NDFF 宁德市富发水产有限公司企业标准 Q/NDFF 004—20 19 刺激隐核虫感染大黄鱼的攻毒实验 操作规范 宁德市富发水产有限公司 发布 前言 本标准按照GB/T 1.1——2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由xxx 管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC 156 ）归口。 本标准起草单位：厦门大学、宁德富发水产有限公司、福建省农业科学院。 本标准主要起草人：白华强、赵吉、徐鹏、龚晖、柯巧珍、余训凯、陈佳、郑炜强。 2 大黄鱼的刺激隐核虫人工感染实验操作规范 1 范围 本标准给出了刺激隐核虫感染大黄鱼的攻毒实验过程中大黄鱼暂养、刺激隐核虫滋养体 收集、刺激隐核虫包囊培养、刺激隐核虫幼虫计数、人工感染的操作流程和技术要求。本标 准适用于大黄鱼的刺激隐核虫人工感染实验 ，同时本标准为石斑鱼等其他海水鱼刺激隐核虫 感染实验提供参考。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新的版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 32755 大黄鱼 NY/T 5061-2002 无公害食品大黄鱼养殖技术规范 GB/T 34733—2017 海水鱼类刺激隐核虫病诊断规程 3 试剂与器材 3.1 海水 海水经24h 以上暗沉淀及砂滤处理后，用250 目以上的筛绢网过滤。除此之外，各理 化指标还要满足表1 所示的要求。 3 表1 海水各理化指标要求 理化指标 温度（℃） 盐度（‰） DO （mg/L ） PH 氨氮含量(mgN/L) 要求 27±1 29-32 5.0 7.9-8.3 0.1 用于培养刺激隐核虫的海水除满足以上条件，还要进行120℃下30min 的高温灭菌处理。 3.2 甲醛溶液（35%-40% ） 3.3 吸管 3.4 光学显微镜 3.5 塑料软管 3.6 小型气泵 3.7 镊子 3.8 气石 3.9 载玻片 3.10 移液枪 3.11 水浴锅 3.12 500ml 烧杯 4 实验大黄鱼的暂养 4.1 大黄鱼 4 实验所用大黄鱼应符合GB/T 32755 的规定 ，按GB/T 34733—2017 检测，未感染刺激 隐核虫。 4.2 实验大黄鱼的暂养 实验大黄鱼的暂养按NY/T 5061-2002 的规定执行。 5 刺激隐核虫的传代培养 5.1 滋养体收集、培养 5.1.1 被刺激隐核虫感染的大黄鱼的收集、鉴定 在刺激隐核虫病流行季节前往大黄鱼养殖区采集经诊断确认为患刺激隐核虫病的大黄鱼，诊 断规程按照GB/T 34733—2017 的规定执行。 5.1.2 获取滋养体 取诊断为患刺激隐核虫病的大黄鱼，用镊子刮取鳃、皮肤等感染部位的刺激隐核虫滋养 体于盛有适量灭菌海水的培养皿中，刺激隐核虫滋养体的鉴定按照GB/T 34733—2017 的规 定执行。 5.1.4 滋养体的培养 5