实验四果蝇唾腺染色体的观察.pptVIP

实验五 果蝇唾腺染色体标本的制备与观察 实验目的 实验原理 实验材料与药品 实验方法 实验作业 实验目的 练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。 观察果蝇唾腺染色体的结构特点。 实验原理 发现 1881年，意大利Balbiani在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了巨大的“永久性染色质纽”。 1930年前后，研究表明，“染色质纽”实质上是特殊的染色体。 后来，其他学者又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。 形成原因 染色体螺旋化程度不高。 核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育过程中，细胞核内的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体DNA也不分开（核内复制），形成了多线染色体。 体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈现一种联会状态，使其比一般的体细胞染色体粗大。 特点 巨大； 体联会现象决定了染色体看起来只有半数； 各个染色体中异染色质多的着丝粒部分相互靠拢形成染色中心； 横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自对应排列，具有种的特异性。 若有缺失、易位、倒位、重复等现象，很容易在唾腺染色体上识别出来。 实验材料与药品 果蝇三龄幼虫 0.8%生理盐水 0.2mol/LHCl 蒸馏水 苯酚品红 实验方法 三龄幼虫的饲养； 剥取唾液腺 在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端1/3处，右手的解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，唾腺随之而出，丢弃杂质。 解离和染色：取解剖好的唾腺于载片上，加1-2滴蒸馏水，使之成为低渗溶液，处理8-10分钟，再经1mol/L HCl解离1-2min后，只需要用解剖针轻轻拨动，脂肪等杂质便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去酸液，用碱性品红染色10分钟（或醋酸洋红染色15分钟或龙胆紫染色1分钟）左右。 揉片及观察 幼虫培养的注意事项 培养基要较稀且富含营养 追加酵母 幼虫密度要小 低温培养 唾液腺 位置：在幼虫体前约1/3处。 形状：形如一对香蕉，上小下大。一边常附着带状的不透明的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围的组织都透明。 实验作业 1、绘制你所观察到的果蝇唾腺 染色体。 2、剥离果蝇唾液腺时应该 注意的 问题？ 果蝇唾腺染色体 果蝇各染色体臂的形态 各臂的末端模式图 注意事项 一定要加生理盐水，否则唾腺易干； 水不可过多，否则幼虫易漂起来并且活跃，影响剥离； 剥离时要去干净脂肪； 染色时间不可过长，否则背景着色； 压片前先轻敲，使之分散，压片时朝一个方向揉片。 * * *