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- 2019-10-23 发布于天津
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观察酵母菌的形态,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
掌握酵母菌的一般形态特征。
明确血球计数板计数的原理。
掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。 ;
;一、酵母菌形态的观察 (美蓝浸片的观察)
1. 在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作接种环挑取少量酵母菌苔放染色液中,混合均匀。
2. 用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。
注意:盖玻片不宜平放,以免产生气泡影响观察
3. 将玻片放置约3分钟后镜检,先用低倍镜观察后用高倍镜观察酵母菌的形态,并根据颜色区别死活细胞。;二.显微镜直接计数法
1. 菌悬液的制备:以无菌水将酿酒酵母制成浓度适中的菌悬液
2. 镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检,若有污物,则需清洗,吹干后才能计数。
3. 加样品:将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,一般计数室均能充满菌液。
注意:取样时先要摇匀菌液;加样时计数室不可有气泡产生。;
二.显微镜直接计数法
4. 显微镜计数:加样后静止5分钟,然后将血球计数板置于显微镜下,先用低倍镜找到计数室,再用高倍镜进行计数。
在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度再计数。一般样品稀释度要求每个中格内15-20个菌体为宜。每个计数室选5个中格
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