实验室常用仪器使用及管理 医学遗传研究室 黄承滨 实验室仪器的配备 根据教研室总体布局和实验室功能的设置分为: 课题小组型:设备较完整,一般常用仪器都具备比如:离心机、电冰箱、电泳仪、水浴箱、酸度计、电子天平、混匀器、PCR仪等; 功能型:电泳室:大规模垂直板电泳、脉冲场电泳、等点聚焦电泳及超级恒温水浴和配套稳压电源等; 专用型:如:无菌间、低温室、PCR室、超速离心机室、暗室等 一、容器处理 ㈠ 清洗液的配置 ㈡ 玻璃器皿的处理及烘干、 高压灭菌(853 洗涤法) ㈢ 橡胶类制品的处理 ㈣ 手术器械的处理 ㈤ 载玻片及盖玻片器的处理 ⑴ 清洗液的配制方法 ⑵ 清洗液配方 清洗液常用的有两种,它是根据玻璃器皿的污净程度选之; ① 强液: 重铬酸钾 120g 浓硫酸(98%) 比重1.834 160ml 自来水 1000ml ② 弱液: 重铬酸钾 50g 浓硫酸(98%)比重1.834 90ml 自来水 1000ml ③ 中液: 如需要介于强液与弱液之间的配方:可取三种试剂的平均值,即为中液 注: 如果清洗液经使用变色为黑绿 色时,表明清洗液已经失效,需重 新配置。在挟持器皿时,忌用金属 工具,以免腐蚀。 ㈡.玻璃器皿的处理及烘干、高压灭菌(853洗涤法) ⑴ 先用自来水将玻璃器皿洗去脏物,再用洗涤剂煮沸30分钟,趁热刷洗干净(或用超声波清洗机用洗涤剂清洗); ⑵ 将玻璃器皿内的洗涤剂充分洗去,再将玻璃器皿置于装有自来水的容器内,要将玻璃器皿的空气排净,并流水冲洗30分钟)洗涤剂会影响细胞长); ⑶ 将玻璃器皿洗净、空干(约24时); ⑷ 将空干的玻璃器皿,置于装有清洗液的容器内,要将玻璃器皿的空气排净,使玻璃器皿装满清洗液,浸泡48小时(有磨口的玻璃器皿:如玻璃注射器,磨口瓶等,免于浸泡清洗液这一步); ⑸ 将玻璃器皿从清洗液中取出,用自来水充分冲洗8次,并流水冲洗30分钟后,将玻璃器皿置于装有蒸馏水的容器内,要将玻璃器皿的空气排净,使玻璃器皿装满蒸馏水,浸泡48小时,使 清洗液的酸性物质完全去掉; ⑹ 将玻璃器皿再用蒸馏水、双蒸水分别冲洗5次和3次; ⑺ 烘干、高压灭菌: ① 将洗净的玻璃器皿,倒置于80℃的烤箱内,烘干; ② 如果是无菌室内,要用的玻璃器皿,则用(纱布包好脱脂棉制好的)棉塞塞紧器皿口,再用硫酸纸及牛皮纸包好并扎好(玻璃注射器要放入上下垫有纱布的饭盒内,并将注射器桶和芯分开,按对放好),高压灭菌(15磅20分钟); 培养瓶、移液管、离心管等要放入上下垫有纱布的搪瓷盘内,放置烤箱高热灭菌(180℃2小时)。 培养瓶、移液管、离心管等要放入上下垫有纱布的搪瓷盘内,放置烤箱高热灭菌(180℃2小时)。 (三)载玻片及盖玻片器的处理 ⑴ 载玻片 将载玻片从包装中取出,去掉载玻片中夹的纸,在用前24小时将载玻片放入95%乙醇的容器内, 浸泡、去脂后取出,用真丝布将玻片仔细擦净, 使之无尘无毛无油渍,放入干净有盖的盒内备用; ⑵ 盖玻片 载玻片在用前24小时,将载玻片放入95%乙醇的 容器内,浸泡、去脂后取出用真丝布将玻片仔细 擦净,由于盖玻片薄擦拭时要用拇指和食指在真 丝布下,小擦使之能感到手指能用上力而又不使 盖玻片不碎,为好。 二、 仪器设备 分类: ㈠ 加热仪器、设备 ㈡ 低温仪器、设备 ㈢ 高压、灭菌设备 ㈣ 分析、层析及电泳相关仪器、设备 ㈤ 称量、测量仪器设备 ㈥ 真空设备 ㈦ 振荡及粉碎设备 ㈧ 水处理设备 ㈨ 离心设备 ㈩ 无菌、通风净化设备 (十一) 显微镜及图形图像设备、仪器 ㈠ 加热仪器、设备 1.电磁炉 使用中的注意事项: ⑴ 一定要使用不锈钢容器;不锈钢容器与电磁炉接触的底面直径要大于12CM; ⑵ 不锈钢容器与电磁炉接触的底面要平,不要有上凸或下凹; ⑶ 不锈钢容器与电磁炉接触的底面,不能 是复合底; ⑷ 不要将空不锈钢容器放在电磁炉否则会,使将不锈钢容器产生的热量,将电磁炉面烫坏; ⑸ 容器内所加入的液体,不能多于容器高度的2/3,入容器内所加入的液体含有洗涤剂等去污剂,则不能多于容器高度的1/2; ⑹ 不能在电磁炉上使用搪瓷盆等非不锈钢容器; ⑺ 在使用完毕时,关闭电源开关后
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