血清胆碱酯酶测定标准操作规程.docVIP

玉环县人民医院检验科 文件编号：JYK-3-SH-016 版本/修订号：C/0 主题内容 生化室作业指导书 生效日期 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 4 页 编写 制定日期 审核 审核日期： 核准 执行日期 李永臣 2010-09-15 李永臣 2011-07-01 章林华 2011-07-01 血清胆碱酯酶测定标准操作规程 1 检验申请 单独检验项目申请：血清丁酰硫代胆碱法碱酯酶测定(缩写ChE)，组合项目申请：血生化中肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 2.1 标本采集 2.1.1 常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存 2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2 标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。-20℃保存稳定6个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h以上禁食空腹状态。 2.3.2 可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。 3 方法原理 Cholinsterase Butyrylthiocholine　iodide+H20…………thiocholine+butyrate, Thiocholine+DTNB………2-nitro-5mercaptobenzoate, 通过测定有色产物480nm处吸光度的变化速率，求得血清中胆碱酯酶的活性。 4 试剂及其他用品 4.1 试剂盒名称：胆碱酯酶试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。 4.2 试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。 4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。 4.4 试剂盒主要成分：R1：磷酸盐缓冲液(pH 7.6) 20.0 mmol/L，5,5’-二硫双亚硝基苯甲酸 0.25 mol/L；R2：丁酰硫代胆碱 6.0 mmol/L。含有稳定剂与保护剂。 5 校准品与校准模式 校准品：不使用校准品，以2-硝基-5-巯基苯甲酸的双波长（480/660 nm）毫摩尔消光系数计算Che活性。 6 质控品与室内质控规则 6.1 质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。 6.2 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。 6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。 6.4 质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。 7 适用仪器 适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤 装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 →标本测定 →结果复核 → 报告。 主要分析参数 参见说明书。 10 结果计算 ChE(U/L)＝ΔA/min×K ＝ΔA/min×(VT /Vs ×l×ε ×103) 式中ΔA/min即单位时间中吸光度增高的值，VT为总反应体积ml（试剂总量＋标本量），Vs为标本体积ml，l为比色皿光径cm，ε为pNP的410/670nm波长的毫摩尔消光系数。K值即因子，本法中K值为14852。 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。 11 检验结果的报告及范围 11.1 结果的报告 11.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。 11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告