基层培训-免疫学技术.ppt

注意事项： 本法检测出阳性主要为IgM类RF，阳性血清可连续双倍稀释测效价。每次试验均应设阴、阳性对照。其它见胶乳凝集法注意事项。 第三节???酶联免疫技术及应用 ? 一、酶免疫分析技术 酶免疫分析技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法，是标记免疫技术中使用最广泛的一种方法，具有灵敏度高、特异性强、酶标记物有效期长等优点，现已被广泛应用于医学检验和生物学的各个领域。 （一）原理和分类 酶是催化化学反应的蛋白质，它具有高效性和专一性的特点。酶免疫分析技术是将酶的催化放大作用和抗原抗体反应相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体后，既不影响抗原或抗体免疫反应的特异性，也不改变酶本身的活性。免疫反应进行以后，酶还能催化相应的底物显色，最后利用酶标仪检测颜色的深浅来进行定性或定量分析。显色反应显示酶的存在，表示结合或游离的酶标抗原或抗体的量的变化。 根据反应过程中是否将结合的酶标记物和游离的酶标记物分离，把酶免疫分析技术分为两类：非均相酶免疫测定和均相酶免疫测定。非均相酶免疫测定抗原抗体反应平衡后，将游离的酶标记物和与抗原抗体结合的酶标记物分离开，再通过底物显色进行测定。其代表技术是酶联免疫吸附试验（ELISA）。而均相酶免疫测定由于免疫反应后酶活性的改变，不需将游离的和结合的酶标记物分开。主要用于小分子物质的测定。 （三）常用的标记酶和底物 （1）辣根过氧化物酶（HRP