9.工业微生物育种.pptVIP

②增殖培养（富集培养） ⅰ.适用： 样品中目的菌数量不够多时 ⅱ.目的： 提高样品中目的菌的数量和比例 ⅲ.原理： 通过控制营养成分或培养条件，使目的菌得以繁殖和/或非目的菌的生长受到抑制 ⅳ.方法： ③纯种分离 目的：将目的菌从混杂 的微生物中分离 出来，获得纯培 养 ▲在菌体生长阶段添加蔗糖也能提高细胞壁对溶菌酶的敏感性。 ▲在菌体生长对数期加入适量青霉素,就能使细胞对溶菌酶更敏感。 原生质体制备的其他因素： ▲一般是将原生质体放在高渗的环境中以维持它的稳定性。 ▲菌龄:对数生长中期细胞的细胞壁中肽聚糖含量很低,对溶菌酶敏感。 ▲培养基中添加甘氨酸,可以使菌体(放线菌)较容易被酶解 聚乙二醇（PEG）能有效地促进原生质体融合 一般PEG的使用浓度范围在25-40%。 采用电融合仪:在高频电场下,用直流电穿孔来进行融合。 使原生质体重新长出细胞壁,恢复完整的细胞形态结构。 ③ 原生质体融合 ④ 原生质体再生 不同微生物的原生质体的最适再生条件不同,最重要的一个共同点是都需要高渗透压。 ⑤ 融合重组子的筛选 把融合液涂布在营养丰富的高渗再生平板上,使亲株和重组子都再生成菌落,然后用影印法将它们复制到选择培养基上检出重组子。 间接法 直接法 将融合液涂布在不补充亲株生长需要的生长因子的高渗再生培养基平板上，直接筛选出原