（课件）免疫组化原理及流程介绍.pptVIP

免疫组化的原理及流程介绍 免疫组化原理及流程介绍 主要内容 免疫组化原理及流程介绍 二 免疫组化的原理 免疫组化原理及流程介绍 它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 免疫组化原理及流程介绍 三 免疫组化的基本流程 免疫组化原理及流程介绍 1)用封闭通透液浸润切片 30 min（RT 避光）。 其配法是用预热 40 ml PBS 加120ul TritonX-100 加热几分钟，在临用前加 400 ul的30％H2O2。 2)PBS 溶液洗 3 次×3 min。 免疫组化原理及流程介绍 将切片取出,周围水分用滤纸吸干,用组化笔在组织周围画上圈,在圆圈内组织滴入 5%羊血清（与二抗来源一致）后放入湿盒中,室温 (约30℃)下10～30min。 免疫组化原理及流程介绍 一抗孵育条件在免疫组化反应中最重要，包括孵育时间和抗体浓度。 一抗孵育温度有几种：4度、室温、37度，其中4度效果最佳；孵育时间：这与温度、抗体浓度有关，一般37度1-2h，然后4度过夜和从冰箱拿出后37度复温45min。具体条件还要摸索。 免疫组化原理及流程介绍 甩去切片上的羊血清,用滤纸