汉坦病毒h8205部分核壳蛋白基因在e.coli中的表达.docVIP

汉坦病毒H8205部分核壳蛋白基因在E.coli中的表达 ???? 汉坦病毒H8205部分核壳蛋白基因在E.coli中的表达 ???? 中国病毒学 1999年第2期第14卷 研究报告 ???? 作者：沈昌贤　李钟铎　杨瑞馥　祝庆余 ???? 单位：军事医学科学院微生物流行病研究所，北京100850 ???? 关键词：汉坦病毒；基因工程核衣壳蛋白；酶联免疫吸附试验(ELISA) ???? 　　摘　要　根据汉坦病毒H8205株NP基因的序列，设计一对引物，扩增NP前292个氨基酸多肽基因片段，克隆于表达载体pGEX-3X，与载体中26kD的谷胱苷肽巯基转移酶(GST)融合表达。SDS显示表达产物(GST-NP)主要以包涵体形式存在。Western-blotting表明此融合蛋白有抗原性。包涵体经分离、洗涤、溶解后，Sepharose 6B层析纯化，用此融合蛋白作抗原，进行ELISA法检测临床HFRS病人标本的IgG和IgM，有很好的特异性和敏感性。有生物活性的汉坦病毒H8205 NP的体外表达成功，为汉坦病毒基因工程抗原的大量制备奠定了基础，也为汉坦病毒的临床检测和流行病学调查提供了一种廉价、安全、可靠的抗原。 ???? Expression of the　S genome segment of Hantavirus　H8205 and ???? 　　Applicatio