GB/T 15686-1995高粱中单宁含量的测定.pdf

中华人民共和国国家标准 GB/T 15686-1995 高粱中单宁含量的测定 Sorghum-Determination of tainnin content 本标准等效采用国际标准ISO 9648:1988((高粱中单宁含量测定方法》。 1主题内容与适用范围 本标准规定了高粱中单宁含量的测定方法。 本标准适用于高粱中单宁含量的测定。 2引用标准 GB 5491粮食、油料检验 扦样、分样法 GB 5497粮食、油料检验 水分测定法 3 原理 用二甲基甲酞胺溶液振荡提取高粱中单宁。过滤后取滤液，在氨存在的条件下，与柠檬酸铁按形成 一种棕色络合物，用分光光度计在525 nm波长处测定其吸光度值，与标准系列比较定量。 4试剂及溶液 所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 4.1单宁酸标准溶液：2.5 g单宁酸溶于水中，定容至1 000 ml,。该溶液避光、低温保存，一周内稳定。 单宁酸标准来源不同，对测定结果有影响。因此，推荐使用分子量为1 701.25的单宁酸作为标准品，并 且配制0. 3 mg/ml,的单宁酸标准溶液，按6.5.2测得吸光度值应在。.45-0. 55范围之内。 4. 2 8. 0 g/L氨溶液：取浓氨水（25%-280o)3. 6 mL，定容至100 mL, 4.3 75 o (v/v）二甲基甲酞胺溶液：取75 mL二甲基甲酞胺，加水约20 mL，混匀，放至室温，然后定 容至100 mL, 注意：二甲基甲酞胺对肺、皮肤和眼睛有伤害。 4. 4 3. 5 g/L柠檬酸铁铁溶液：柠檬酸铁按试剂铁的含量在17 0 0 ( m/m ) ^--20% ( m/m）之间；3. 5 g/L 溶液，使用前24 h配制。 5仪器 ‘ 了 八 ︺ ︺ 叹 ． ． 月 分析天平：感量0. 0001 g, 0 ﹃ ‘ 机械粉碎机：带孔径为1. 0 MM的筛子。 只 口 ‘ ︺ 中速滤纸。 只 峪 月 振荡机。 亡 以 哎 ： ︺ 可见分光光度计：10 mm比色皿。 」 移液管：50 mL, 国家技术监督局1995一08一17批准 1996一01一01实施 / GB/T 15686-1995 5.7刻度移液管：1 mL,10 mL, 5.8试管。 5.9容量瓶：25 mL,. 5.10具塞三角瓶:100 mL, 6分析步骤 6．1试样制备 按GB 5491取样。 样品弃去杂质，用机械粉碎机粉碎，并全部通过1. 0 mm孔径的筛子，充分混匀。 粉碎的高粱试样在避光、干燥的条件下最多保存几天。因此，试样粉碎后应尽快测定。 6.2水分测定 按GB 5497测定试样水分含量。 6.3提取 称取试样约lg，精确至0. 000 1 g,置于100 mL三角瓶中，准确加入50 rnL 75％二甲基甲酞胺溶 液，加塞子密封，于振荡机上振荡60 min，然后用双层滤纸过滤，滤液备用。 6.4 测定 6.4.1用移液管吸取提取液（(6. 3) 1. 0 mL，置于试管中，用移液管移加6. 0 mL水和1. 0 mL氨溶液， 振荡均匀、静置。自加氨水10 min后，以水作空白，用分光光度计在525 nm波长处测定吸光度值。 6.4.2用移液管吸取提取液（(6. 3) 1. 0 mL，置于试管中，用移液管移加5. 0 rnL水和1. 0 mL柠檬酸铁 按溶液，振荡均匀，再加1. 0 mL氨溶液，充分振荡均匀、静置。自加氨水10 min后，以水作空白，用分光 光度计在525 nm波长处测定吸光度值。 结果为两次测定吸光度值之差。 6.5绘制标准曲线 测定试样的当天，按以下步骤绘制标准曲线。 6.5.1用移液管准确吸取。,1. 0,2. 0,3.0,4. 0,5. 0 mL单宁酸标准榕液（(4.1)，分别置于6个25 mL 容量瓶中，用75％二甲基甲酞胺溶液稀释至刻