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复合活性多肽对肝脏细胞的修复作用及 与格列本脲联合降糖效果探究 1* 1 Mian Khaqan Shah1 1 2 2 2 崔立 韦瀛佳 蔺智兵 林军庭 林浩 万鹏 1 上海交通大学农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室 2 上海蜂妮医药科技有限公司 摘要: 活性肽具有来源广泛、安全性高、功能多样等特点，对许多疾病的控制和治疗都有 不错的效果。本研究采用来自牡蛎、海参、大豆等生物的复合活性多肽为原料，通过细胞实验 和动物实验探究其在抗氧化和治疗糖尿病中的效果。在 HO 氧化应激损伤的肝细胞WRL68 2 2 细胞模型中发现，经活性多肽培养后细胞活率、ROS 水平、细胞凋亡情况均有改善， 且活性 多肽浓度越高效果越好，证明活性多肽确实具有抗氧化的效果。在四氧嘧啶法构建的糖尿病小 鼠模型中，单独施用活性肽也具有一定的降血糖作用，并能与格列本脲联用，在减量 70%的情 况下维持格列本脲的疗效，能很好的控制血糖水平。本研究为改良已有糖尿病治疗方法提供 了新思路，也为开发新的口服降糖药物提供了相关的重要信息。 关键词：活性肽；细胞修复；降糖；格列本脲 1、前言 活性肽是具有一定生物功能或生理效应的二肽到多肽的总称，由二十种天然氨基酸按 照一定的顺序和结构排列组成，氨基酸的种类、排列顺序决定其功能。活性肽的来源极其丰富， 一般以其原料种类命名，如大豆肽、米糠肽、花生肽、海参肽、牡蛎肽等等。活性肽不仅能直接 [1-2] 被机体吸收利用，同时也具有促生长、免疫调节、抗病毒、抗氧化等诸多作用 。本试验主要 探讨复合活性多肽在抗氧化和降血糖方面的作用。 过氧化氢、羟自由基等活性氧具有强氧化性，因辐射、新陈代谢、环境污染等不断产生，又不 断被机体清除，维持动态平衡。当这一动态平衡被打破时，过多的活性氧会造成细胞和基因水平 [3] 的损伤，从而导致细胞凋亡 。因此，若能及时清除这些活性氧，则能避免细胞因受损而凋亡。 除我们熟知的还原性物质维生素 C、维生素 E 等外，一些抗氧化肽也同样有此功效，能够减少 细胞损伤，促进细胞修复。有研究表明，海洋生物体内就具有由超氧化物歧化酶、过氧化物酶 [1-2] 和过氧化氢酶组成的抗氧化体系 ，以及多种甾醇类物质。从一些海洋生物如海参、扇贝、 牡蛎中提取出来的生物活性多肽同样具有抗氧化、抗衰老的作用。 糖尿病是一种由环境因素和遗传因素共同决定，以高血糖为特征的代谢性疾病，临床主要表 现为因胰岛素分泌不足或胰岛素作用抵抗引起的糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱。根据世界卫生组织 统计，糖尿病患者人数逐年攀升的同时，糖尿病已成为继心血管疾病、肿瘤、呼吸 系统疾病之后 [4] 的第四位威胁人类健康的非传染性疾病 。又因糖尿病常伴有多种严重并发症，也是失明、肾脏 衰竭、心脏病、中风和下肢截肢的主要原因。目前尚无根治糖尿病的方法， 虽然磺酰脲类和双 胍类药物可以有效控制病情及并发症发展，但同时具有难以消除的副作用。因此，如何消除副 1 作用并提高疗效成为了学者们共同的目标，具有降血糖功能的小分子多肽逐渐引起人们的关注。 经研究确定具有降糖功能的活性肽数目繁多，来源广泛，但对于活性肽与降糖药物联合治疗效果 的研究尚不充分。 2.复合活性多肽成分及营养价值分析 2.1 试验材料与仪器 2.1.1 试验材料 上海蜂妮医药科技有限公司提供的复合活性多肽，主要成分为大豆肽、人参肽、牛初乳、海 参肽、牡蛎肽。 2.1.2 主要仪器 多肽的分离纯化采用柱层析法，由Thermo 公司生产的EASY-nLC 1200 液相色谱仪完成， 使用德国迈克公司生产的色谱柱，型号为Reprosil-Pur C18-AQ，膜厚1.9um，内径0.075mm， 柱长 250mm。肽链的序列分析由Thermo 公司