分子细胞生物学——细胞生物学研究技术-精选课件(公开).pptVIP

速度沉降(velocity sedimentation)主要用于分离密度相近而大小不等的细胞器。这种沉降方法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。 生物颗粒(细胞器)在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。 速度沉降 等密度沉降(isopycnic sedimentation)适用于分离密度不等的颗粒。 细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和是够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的细胞器分离。 等密度沉降 二、层析分离技术 层析是广泛使用的分离蛋白质的方法，它是根据蛋白质的形态、大小和电荷的不同而设计的物理分离方法。 ①凝胶过滤层析(gel filtration chromatography) ②离子交换层析(ion-exchange chromatography) ③亲和层析(affinity chromatography) 凝胶过滤层析 又称排阻层析或分子筛过滤，主要是根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离和纯化的一种方法。 原理：蛋白质的体积大小不一，凝胶上有大小不一的孔；大的蛋白质在凝胶中不进入孔内直接下来，速度最快，中等大小的进入大孔中，下来速度较慢，小的蛋白