SN／T 1173-2003_鸡病毒性关节炎抗体检测方法　酶联免疫吸附试验.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜１１７３ ２００３ 鸡病毒性关节炎抗体检测方法 酶联免疫吸附试验 　 ㅤㅤㅤㅤ 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犱犲狋犲犮狋犻狅狀犪狀狋犻犫狅犱犻犲狊犪犪犻狀狊狋犪狏犻犪狀狏犻狉犪犾犪狉狋犺狉犻狋犻狊狏犻狉狌狊 犵 — （ ） 犈狀狕犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅犫犲狉狋犪狊狊犪 犈犔犐犛犃 狔 狔 ２００３０３１７发布 ２００３０９０１实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 ／ — 犛犖犜１１７３ ２００３ 鸡病毒性关节炎抗体检测方法 酶联免疫吸附试验 １ 范围 　 本标准规定了应用酶联免疫吸附试验（ ）检测鸡血清中抗鸡病毒性关节炎抗体的方法。 ＥＬＩＳＡ 本标准适用于抗鸡病毒性关节炎的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。 ２ 操作方法 　 ２．１ 原理 　 本标准采用 ＥＬＩＳＡ间接法。该方法利用抗原抗体反应具有特异性，将特异性的鸡病毒性关节炎 ＥＬＩＳＡ抗原吸附到固相载体的表面后，待测物中若含有相应的抗鸡病毒性关节炎病毒的抗体，则可与 所包被的抗原相结合，并能继续和相应的羊抗鸡的酶标抗体结合形成复合物。在遇到相应的底物时，复 合物中的酶能催化底物反应。其显色的深浅与相应的抗体量成正比。可借助颜色反应的深浅来定性。 在建立标准曲线的情况下还可以定量（本标准仅作定性用）。 ２．２ 试剂和材料 　 ２．２．１ 试剂 ㅤㅤㅤㅤ 　 配方见附录 。 Ａ ） 包被液： ／ 碳酸盐缓冲液（ ）。 ａ ０．１ｍｏｌＬ Ｈ９．６ 　 ｐ ） 洗涤液：含 ／ 氯化钠及 的 ／ 磷酸盐缓冲液（ ， ｂ ０．５ｍｏｌＬ ０．１％Ｔｗｅｅｎ２０ ０．０１ｍｏｌＬ ＰＢＳ Ｈ７．２～ 　 ｐ ７．４）。 ） 封闭液：含 犊牛血清及 的 溶液。 ｃ ５％ ０．１％Ｔｗｅｅｎ２０ ＴＮＥ 　 ） 底物溶液：含 邻苯二胺（ ）、 双氧水的柠檬酸 磷酸盐缓冲液（ ）。 ｄ ０．０４％ ＯＰＤ ０．０５％