医用胶原蛋白类产品的表征和质量控制.PDF

技术共识 医用胶原蛋白类产品的表征和质量控制 1 背景和意义 近年来，随着人们对胶原蛋白结构和功能等研究的不断深入，基于胶原蛋 白产品在世界范围内的需求快速增长。胶原蛋白肽在食品、保健食品及化 妆品等领域的应用已十分广泛。胶原蛋白在医疗领域的应用，如敷料、植 入材料以及组织工程医疗产品等也日益增长。胶原蛋白是结缔组织的主要 蛋白成分，是与机体的细胞、组织和器官功能息息相关的功能性蛋白，具 有良好的生物相容性和生物可降解性，同时具有如高拉伸强度、低免疫性、 止血性能以及促进细胞生长等性能。因此，胶原蛋白在再生医学领域的应 用备受关注，各类大中小企业纷纷介入医疗产品的研发，显示了巨大的市 场潜力。然而，相对于迅速发展的市场，胶原蛋白质量控制技术，标准和 规范的建立相对滞后，这给产品的质量控制和安全使用留下了隐患，也限 制了相应产业的规范健康发展。美国ASTM 发布了关于可聚合胶原产品及 [1] 其相关的胶原-细胞相互作用表征和标准化指南 ，为胶原类产品的质量控 制和质量评价提供了参考。 胶原聚合物及自组装胶原基产品 （统称胶原类产品）在医疗领域的应用主 要包括：作为初始材料用于外科植入物、组织工程医疗产品（TEMPs ）的 支架、敷料、治疗用细胞支架或药物的载体以及用于基础研究、药物开发 和毒性测试的三维（3D ）体外组织系统或模型。 胶原应用范围广泛，产品形式多样。胶原类产品的实际应用宜基于材料的 生物相容性和预期特定应用的功能性指标，包括物理、化学和生物学检测 与评价的数据进行设计开发。因此，了解和掌握胶原类产品质量和安全性 相关的性能指标和相应的检测评价方法，对于产品研发生产、质量控制、 检测评价以及技术审评都具有重要意义。 2 适用范围 本文为基于特定的医疗用途，例如（但不限于）创伤或止血敷料、外科植 入物及组织工程医疗产品（TEMPs ）等，在筛选、表征和标准化合适的胶 原类产品时提供参考。 本文所列参数主要为基于纯化的I 型胶原聚合物及自组装胶原基产品（I 型 胶原类产品）的考虑，重组的胶原或者其他类型的胶原可以参考，但并不 一定适用于全部胶原产品。某一特定的 I 型胶原类产品也不一定需要检测 所有指标。 3 术语和定义 1 3.1 胶原 （collagen ） 一类含有至少20 种在遗传学上不同类型的分泌蛋白质家族，主要担任机体 的结构支撑功能，并具有独特的由三条多肽链（被称为α链）组成的三螺 旋结构的构型。 3.2 胶原聚合物 （collagen polymer） 纯化的胶原产物，在不引入外源物质（如交联剂）的条件下，具有自组装 或聚合成为更高级结构的能力。本文主要指纯化的I 型胶原产物。 3.3 胶原仿生多肽 （collagen mimetic peptide ） 代表胶原的三螺旋结构部分的特定氨基酸序列，类似于天然胶原的三螺旋 构型，通常是 “脯氨酸-羟脯氨酸-甘氨酸”—[-(Pro-Hyp-Gly)-] 。 3.4 前胶原（procollagen ） 由三条羧基化多肽链（α链）组成的胶原分子；该多肽链的氨基（NH - ）- 2 和羧基（COOH- ）-端前肽均为完整的（见图1）。 图 1. 前胶原分子和相关的前肽，端肽和三螺旋区域示意图。用前胶原酶酶切法去除 前胶原分子的氨基-和羧基-端前肽即获得原胶原。 3.5 前肽 （propeptide） 单个前胶原多肽链（α链）中氨基-和羧基-端的非三螺旋区域，决定三螺 旋折叠和前胶原分子的形成（见图1）；前肽的去除是胶原成纤维过程和自 组装过程的前提。 3.6 前胶原多肽链 （protocallagen） 由核糖体合成的单个胶原α多肽链。 3.7 原胶原（tropocollagen ） 由去除了氨基-和羧基-端前肽的三条α链组成的胶原分子（图1）；羧基-和 氨基-端的端肽仍保持完整。原胶原能进行自组装形成纤维化网络。 3.8 端肽 （telopeptide ） 原胶原蛋白链上氨基-和羧基-端的非三螺旋区域。端肽对于成纤维过程和 分子间交联键的形成非常重要（图1）。 3.9 去端肽胶原 （atelocollagen ） 端肽区域被部分或全部从原胶原分子中去除的三螺旋分子。这是基于酶提 取法（如胃蛋白酶