细菌的培养及鉴定.pptVIP

抗酸染色步骤 2、染色包括初染、脱色、复染三步。 石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’ 美蓝复染1 ’ 冲洗 干燥 油镜观察 冲洗 冲洗 初染 脱色 复染 抗酸染色结果 抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。 抗酸杆菌报告 300个视野仅见到1—8条抗酸杆菌填写条数 1+：镜检查见3-9条抗酸杆菌/100高倍镜视野 2+：镜检查见1—9条抗酸杆菌/10高倍镜视野 3+：镜检查见1-9条抗酸杆菌/高倍镜视野 4+:镜检查见9条抗酸杆菌/高倍镜视野 抗酸染色注意事项 染色充分 脱色时间宁长勿短 在涂抹痰标本时严禁对载玻片进行加热 临床标本培养基选择 生殖道标本根据临床医生所写的检验项目接种相应的平板及操作： 淋球菌培养接种淋球菌平板;念珠菌培养接种沙保罗培养基；支原体培养则按《支原体培养的操作规程》操作；作普通培养则接种血平板和巧克力平板 观察细菌在平板上的生长现象 血平板：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 mac平板：大小、形状、颜色、透明度、湿润度、黏度 巧克力平板：大小、形状、颜色、透明度、湿润度、黏度 * * 革兰阴性菌 葡萄球菌 细菌的初步分类 细菌的分离与纯化：自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的鉴定。如果混有杂菌，应该重新转种分纯。 染色与镜检： 首先通过革兰氏染色确定基本的分类：（1）G+球菌（2）G-球菌（3）G-杆菌（4）G+杆菌。此外，如果镜下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体，可能是真菌。 金黄色葡萄球菌 最重要的致病葡萄球菌 血平板上菌落有明显β溶血环，颜色呈金黄色、灰白色或柠檬色 分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇 血浆凝固酶和DNA酶阳性 * * 葡萄球菌 念珠菌显色培养基 绿色—白色念珠菌 蓝色—热带念珠菌 白色—其他，细菌被抑制 紫色—光滑 粉色—克柔假丝酵母菌 嗜血杆菌的鉴定途径 只能在营养条件高的巧克力平板上生长，菌落为中等大小、圆形、灰白色、透明 革兰染色：G-小杆菌 卫星实验就可以帮助初步鉴定 * * 嗜血杆菌 奈瑟氏菌属鉴定 在血平板和巧克力平板上生长，mac上不生长 血平板形成灰色、湿润、透明或半透明、不溶血的菌落 巧克力平板上形成圆形、灰蓝色的似露滴状菌落 革兰染色： G-双球菌，呈肾形或咖啡豆形，凹面相对 氧化酶和触酶都均为阳性 奈瑟氏菌属有11个种，临床就淋病奈 菌和脑膜炎奈瑟菌 最为重要 奈瑟氏菌属鉴定流程 菌落观察：灰色、湿润、透明或半透明、不溶血 涂片染色：G-双球菌，呈肾形或咖啡豆状 氧化酶试验+ 触酶+ + 麦芽糖 -- 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 细菌的鉴定与药敏 卫生部重点监控的6种MDRO MASA:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 —判断标准：对苯唑西林耐药或头孢西丁诱导实验阳性 CRAB：耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌 —判断标准：对亚胺培南或美罗培南耐药 VER：耐万古霉素肠球菌 —判断标准：对万古霉素耐药 ESBLs：产超广谱β内酰胺酶细菌。包括：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌等 —判断标准：对第3代和第4代头孢菌素和氨曲南耐药 CRE:耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌 —判断标准：对亚胺培南等碳青霉烯类耐药 MDR/XDROA:多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌 —判断标准：对亚胺培南等碳青霉烯类耐药 临床常见问题 痰涂片与痰培养结果不一致？ 培养和涂片选择的痰液不同；标本采集时间过长，部分苛养菌死亡； 选择