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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
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犛犖犜2097 2008
入出境人员猴痘检验规程
犆狅犱犲狊犳狅狉犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犿狅狀犽犲 狅狓犪狋犲狀狋狉犲狓犻狋狅狉狋
狔狆 狔 狆
ㅤㅤㅤㅤ行业标准
20080717发布 20090201实施
中 华 人 民 共 和 国 发 布
国家质量监督检验检疫总局
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犛犖犜2097 2008
入出境人员猴痘检验规程
1 范围
本标准规定了入出境口岸入出境人员猴痘病毒的实验室检验方法与结果报告,包括样本采集、处
理,检验程序、方法,结果判定及报告。
本标准适用于入出境口岸猴痘病毒的实验室检验。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1
猴痘 犿狅狀犽犲 狅狓
狔狆
由猴痘病毒( )引起的人兽共患传染病,临床主要表现有高热、头痛、背痛、全身不
monke oxvirus
yp
适、咳嗽、淋巴结肿大,伴全身出现类似天花的皮疹,偶尔出现腹痛。
2.2
实时荧光 犘犆犚狉犲犪犾狋犻犿犲犳犾狌狅狉犲狊犮犲狀犮犲犘犆犚
实时荧光 PCR方法是在常规 PCR的基础上,加入一条特异性的荧光探针。该探针为一段寡核苷
酸,两端分别标记一个报告基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基
团吸收; 扩增时,利用 酶的 ’ ’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭基团分
PCR 犜犪狇 53
ㅤㅤㅤㅤ行业标准
离,从而荧光监测系统可以接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧
光信号的积累与 PCR产物形成完全同步。
2.3
值
犆狋 犮犮犾犲狋犺狉犲狊犺狅犾犱
狔
每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。
3 仪器和设备
需要如下仪器设备。
———Roche荧光定量 PCR仪;
———生物安全柜;
———高压灭菌器;
———普通冰箱;
———普通台式离心机(带密封的离心安全杯);
———冷冻离心机(带密封的离心安全杯);
———研钵;
———涡旋器。
4 试剂
4.1 核酸提取试剂:使用 TakaRa基因组 DNA提取试剂盒1),详见说明书。
1)
4.2 HotStartMixmaster反应试剂盒购自 Roche公司 。
1) 由指定单位提供,给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具
有相同的效果,则可使用这些等效产品。
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