SN／T 3984-2014_犬细小病毒实时荧光PCR检疫技术规范.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 / — SNT3984 2014 犬细小病毒实时荧光PCR检疫技术规范 uarantine rotocolforcanine arvovirusb real-timePCR Q p p y ㅤㅤㅤㅤ行业标准 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 / — SNT3984 2014 犬细小病毒实时荧光PCR检疫技术规范 1 范围 本标准规定了犬细小病毒实时荧光 PCR检测方法的技术要求。 本标准适用于易感动物犬细小病毒的检测。 2 规范性引用文件 。 , 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , ( ) 。 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 / 分析实验室用水规格和试验方法 GBT6682 / 、 SN T2123 出入境动物检疫实验样品采集 运输和保存规范 3 仪器和试剂 3.1 主要仪器 3.1.1 荧光定量 PCR仪。 ㅤㅤㅤㅤ行业标准 3.1.2 高速冷冻离心机。 3.1.3 旋涡混匀器。 3.1.4 恒温循环水浴槽。 3.1.5 低温冰箱。 3.1.6 可调单头微量移液器。 3.2 主要试剂 , 。 试剂为分析纯或生化试剂 用于实时荧光 PCR的试剂均用无 DNA酶污染的容器分装 所有试验 , / 。 用水均为灭菌超纯水 应符合 GBT6682中的三级水要求 3.2.1 动物粪便 DNA提取试剂盒。 3.2.2 动物血液与组织 DNA提取试剂盒。 3.2.3 荧光定量 PCR反应预混液。 犬细小病毒阳性质粒, 序列为 3.2.4 DNA GGCCTGGGAACAGTCTTGACCAAGGAGAACCAACT AACCCTTCTGACGCCGCTGCAAAAGAACACGACGAAGCTTACGCTGCTTATCTTCGC。 3.2.5 实时荧光 PCR扩增所用的引物和探针的序列见表 1。 表 1 引物和TaMan探针 q 引物和探针 序列 长度/b 值/ /