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- 2019-12-23 发布于湖北
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Thank You! 模块三、酶的分离纯化 酶制剂生产技术 生物化工学院 杨芳 引入 微生物经过好气性发酵和厌氧发酵培养后,菌体会大量繁殖,并合成和积累了相当浓度的代谢产物,这时便终止发酵,进入分离加工过程。 不管是胞内产物还是胞外代谢产物,在分离纯化目的产物时,首先都要通过发酵液的预处理。将固相、液相分离后,才能采用各种物理、化学、生物的方法进行产物的进一步分离纯化。 学习情境九 发酵液的预处理 工作任务(一)酶的分离纯化概述 工作任务(二)发酵液的预处理 酶得分离和纯化是酶生产的下游工程,是将酶从细胞或培养基中取出与杂质分离开,而获得符合使用要求的有一定纯度的酶产品的过程。 分离纯化(separation and purification) 工作任务(一)酶的分离纯化概述 浓缩的发酵液 防止酶变性失效 1、低温操作 2、避免过酸过碱:确定合适的缓冲容量的缓冲溶液 3、避免重金属、有机溶剂、微生物污染、蛋白水解酶等破坏分解酶 选择有效的纯化方法 酶与其底物和抑制剂具有高亲和性,因此可使用各种亲和分离法;而且,当这些物质存在时,酶的理化性质和稳定性往往会发生一些有利的变化,这样又扩大了纯化方法与纯化条件的选择范围。 酶活性测定贯穿纯化过程的始终 酶活性测定贯穿纯化过程的始终。通过检测酶活性可以跟踪酶的来龙去脉,为酶的抽提、纯化、
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